酸枣壳木醋液精制及其抗氧化和降血糖作用研究

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人体内过多的活性氧(ROS)会造成蛋白质、脂类及DNA等生物活性分子的损伤,加速机体衰老,而诱发多种疾病。研究表明,木醋液中含有多种生物活性成分,具有明显的抗氧化活性,从而保护机体免受由氧化应激造成的损伤。根据木醋液中化学物质极性及存在形式的差异,本文采用乳化液膜法分离酸枣壳木醋液中酚类物质并通过体外酶活法考察了木醋液的抗氧化和降血糖活性。实验结果如下:(1)从乳化液膜的稳定性及对木醋液中酚类脱除效果两方面对乳化液膜的制备工艺进行了研究。在对乳化液膜稳定性的研究中考察了乳化时间、乳化转速、表面活性剂的种类及体积分数、载体体积分数、内相Na OH溶液浓度、油内比对其的影响,在对木醋液中酚类脱除效果的研究中考察了载体体积分数、内相Na OH溶液浓度、油内比对其的影响,综合液膜稳定性及木醋液脱酚效果确定各因素的实验条件,在此基础上选取表面活性剂T154体积分数、载体体积分数、内相Na OH溶液浓度和油内比四个主要因素,采用BBD响应面法优化各因素。得到乳化液膜稳定性最佳的乳化时间为20 min,乳化转速为4500 r/min,相同制乳条件下,由表面活性剂T154所制备的乳化液膜稳定性优于HT154和Span 80;根据方差分析,各因素对木醋液脱酚率的影响依次是D(油内比)>C(内相NaOH溶液浓度)>B(TBP体积分数)>A(T154体积分数),因素A与C、B与C、B与D为主要交互作用,乳化液膜最佳制备工艺条件为:表面活性剂T154体积分数8%、载体TBP体积分数3%、内相NaOH溶液0.6 mol/L、油内比5:4。此条件下所制乳化液膜稳定性良好,木醋液脱酚率为55.31%。(2)乳化液膜法精制木醋液的研究中考察了萃取时间、搅拌速度和乳水比对脱酚效果的影响,并在此基础上,采用BBD响应面法优化各因素。根据方差分析,各因素对木醋液脱酚率的影响依次是C(乳水比)>A(萃取时间)>B(搅拌速度),因素A与C、A与B为主要交互作用,乳化液膜最佳脱酚条件为:萃取时间25 min,萃取搅拌速度300 r/min,乳水比1:2。此条件下木醋液脱酚率为59.41%。(3)采用DPPH法、ABTS法、FRAP法、·OH清除能力、T-AOC和总还原能力6种方法测定木醋液的抗氧化活性。结果表明木醋液有较好的清除DPPH、ABTS、·OH的能力,有较强的铁离子还原/抗氧化活性,且具有很强的T-AOC和还原能力。以Vc当量表示,木醋液的DPPH自由基清除能力为0.6178±0.0107 mg Vc/mL,ABTS自由基清除能力为1.7547±0.0136 mg Vc/mL,FRAP值为0.8100±0.0132 mg Vc/mL,·OH清除能力为1.9650±0.0300 mg Vc/mL,T-AOC为2.4368±0.0946 mg Vc/mL,总还原能力为1.1283±0.0235 mg Vc/m L;以Trolox当量表示,木醋液的DPPH自由基清除能力为1.07113±0.0201 mg Trolox/mL,ABTS自由基清除能力为2.7349±0.0206mg Trolox/mL,FRAP值为1.6852±0.0225 mg Trolox/mL,·OH清除能力为4.8853±0.0550 mg Trolox/mL,T-AOC为6.7052±0.3568 mg Trolox/mL,总还原能力为2.5363±0.0570 mg Trolox/mL。(4)采用pNPG法测定木醋液对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明木醋液对α-葡萄糖苷酶具有明显抑制作用。稀释倍数在2~8倍范围内,抑制能力均在95%之上,其半数抑制稀释倍数(IC50)为15.771±0.428倍,折合木醋液的取样量为4.06±0.11μL。(5)采用DNS法测定木醋液对α-淀粉酶的抑制活性。结果表明木醋液对α-淀粉酶具有抑制作用,在取样量考察实验中,取样量大于250μL时,对α-淀粉酶活性的抑制能力均在95%之上,其半数抑制取样量(IC50)为136±2μL。
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