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石榴是一种我国广泛种植的水果,因其丰富的营养而深受人们的喜爱。安石榴苷是石榴中一种重要的多酚类物质,分布于石榴的各部位。近年来国内外学者对安石榴苷的活性有着广泛而深入的研究,发现安石榴苷具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抑菌等作用。非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一种慢性代谢性疾病,随着人们饮食结构和生活习惯的改变,这一疾病已成为21世纪一种严重的全球性公共健康问题,NAFLD的发生与肥胖、胰岛素抵抗、炎症、氧化应激等因素有着密切的联系。本研究运用细胞模型评价安石榴苷对非酒精性脂肪肝的改善作用,通过测定相关蛋白的表达以及一些相关的生理生化指标,从胰岛素抵抗、炎症和氧化应激等方面探究安石榴苷的可能作用机理。主要研究成果如下:(1)利用0.25 mM棕榈酸钠与HepG2细胞共同培养12 h后,成功建立NAFLD脂肪变性细胞模型。经过10μg/mL安石榴苷处理12 h后,细胞内脂滴和TG、TC含量显著降低(与模型组相比),说明安石榴苷具有改善NAFLD模型细胞内脂质累积的作用。(2)该NAFLD脂肪变性细胞模型同时发生胰岛素抵抗,表现为胰岛素信号通路IRS/Akt磷酸化受到抑制,细胞葡萄糖摄取能力下降。在用5μg/mL、10μg/mL安石榴苷干预后,细胞内IRS/Akt蛋白磷酸化水平恢复,说明安石榴苷能改善胰岛素抵抗,这可能是安石榴苷改善生物体内肝脏脂质累积的潜在机制之一。(3)AMPK蛋白的激活与减少肝脏脂质生成以及增加脂肪酸氧化有着密切的关系。棕榈酸钠刺激使细胞内AMPK磷酸化水平下降,蛋白活性受到抑制。经过5μg/mL、10μg/mL安石榴苷处理后,细胞内AMPK磷酸化水平恢复,细胞内AMPK蛋白被激活,且ACC蛋白活性受到抑制,说明安石榴苷可以激活AMPK/ACC通路,这可能是安石榴苷改善细胞内脂质累积的一种机制。(4)棕榈酸钠的刺激还可以引起肝脏炎性反应和氧化应激,它们是引起胰岛素抵抗、脂质累积和脂肪性肝炎(NASH)的重要因素。安石榴苷能够有效改善棕榈酸钠刺激引起的细胞内ROS含量的升高,恢复线粒体膜电位,抑制NF-κB、JNK、p38磷酸化水平的升高。说明安石榴苷具有改善炎性反应和氧化应激的作用,这也是安石榴苷改善胰岛素抵抗和脂质累积,延缓NAFLD发展的另一种可能机制。