体外多酶反应指导大肠杆菌莽草酸途径优化提高苯丙氨酸产量

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L-苯丙氨酸是一种重要的食药两用必需氨基酸。微生物发酵法由于具有原料易得、产物纯度高等优点成为目前国内外工业化生产L-苯丙氨酸的主要方法。但微生物中L-苯丙氨酸的合成途径和调控方式较复杂,L-苯丙氨酸的合成效率受到限制。本研究中,构建了一个合成L-苯丙氨酸的E. coli HD-1,经上罐发酵,L-苯丙氨酸产量在48 h可达到45 g/L。以此为出发菌株,分析蛋白组学得出胞内酶浓度相对比例,结合在体外粗酶基础上滴加纯酶得出单个酶绝对浓度的方法,确定莽草酸途径中六个酶(莽草酸激酶AroK/AroL,5
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