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睡眠障碍是女性围绝经期综合征的核心症状之一,主要表现为入睡困难、睡中易醒、白天嗜睡等症状,严重影响患者的身心健康和生活质量。围绝经期睡眠障碍的病因较多,可由雌激素水平降低直接引起,也可由雌激素水平降低导致的潮热汗出、情绪障碍等症状间接引起。本研究通过建立小鼠去卵巢模型和大鼠去势加腹腔注射对氯苯丙氨酸(4-Chloro-DL-phenylalanine, PCPA)致睡眠障碍模型,观察了精乌胶囊治疗围绝经期睡眠障碍的作用,并从激素水平、直肠温度、情绪障碍、步态行为、下丘脑雌激素受体表达、中枢单胺类神经递质含量等方面初步探讨了其作用机制。第一部分精乌胶囊治疗去卵巢模型小鼠睡眠障碍的作用研究该部分实验选取体重为18-22g的KM小鼠,将其按照体重随机的原则分为6组。采用去除双侧卵巢的方法建立模型,模拟人体围绝经期卵巢功能衰退的生理变化。术后4周开始灌胃给予相应剂量的药物：坤宝丸(1.670g/kg),精乌胶囊大剂量(2.70g/kg),精乌胶囊中剂量(1.35g/kg),精乌胶囊小剂量(0.675g/kg),给药体积为0.2mL/10g,假手术组和模型组灌胃给予同体积蒸馏水。每天灌胃给药1次,连续4周。测定小鼠的自主活动、高架十字迷宫中的行为及戊巴比妥钠诱导睡眠的潜伏期和睡眠时间。并测定血清中雌激素及相关激素水平、子宫系数和肾脏系数、子宫病理改变、下丘脑雌激素α受体(Estrogen Receptor alpha, ERa)的表达水平。结果显示,与假手术组相比,去卵巢模型小鼠的睡眠潜伏期明显延长(P<0.05)；在高架十字迷宫中的进入开臂的次数(open arms entrance, OE)占总次数(进开臂次数和进闭臂次数之和)的百分率(OE%)和在开臂停留时间(open arms time, OT)占总时间(在开臂停留时间和在闭臂停留时间之和)的百分率(OT%)无明显差别(P>0.05)；自主活动次数和站立次数明显增加,修饰时间明显减少(P<0.05)；血清黄体生成素(Luteinizing Hormone, LH)和促性腺激素释放激素(Gonadotropin-Releasing Hormone, GnRH)水平、子宫系数、下丘脑ERa表达水平明显降低。与去势模型组小鼠比较,坤宝丸1.670g/kg组,精乌胶囊2.70g/kg、1.35g/kg.0.675g/kg组均能明显缩短模型小鼠的睡眠潜伏期(P<0.05)；精乌胶囊1.35g/kg、0.675g/kg组能明显减少模型小鼠的自主活动次数(P<0.05)；坤宝丸1.670g/kg组,精乌胶囊1.35g/kg、0.675g/kg组能明显增加模型小鼠下丘脑ERa表达水平；各给药组对模型小鼠在高架十字迷宫中的OT%和OE%,血清中孕激素(Progesterone, P)、促性腺激素释放激素(GnRH)、黄体生成素(LH)、卵泡雌激素(Follicle-Stimulating Hormone, FSH)水平,子宫系数和肾脏系数无明显改善作用(P>0.05)。研究结果提示精乌胶囊对去卵巢模型小鼠具有镇静安神的药理作用,但不影响去势小鼠的血清雌激素及相关激素的水平,可能与增加去卵巢小鼠下丘脑ERa表达有关。第二部分精乌胶囊治疗去势加PCPA模型大鼠睡眠障碍的作用研究选取体重为180-220g的SD大鼠,随机分为6组。通过去除大鼠双侧卵巢建立模型模拟人体卵巢功能衰退的生理变化。去势手术4周后开始灌胃给予相应剂量：坤宝丸(1.160g/kg),精乌胶囊大剂量(1.890g/kg),精乌胶囊中剂量(0.945g/kg),精乌胶囊小剂量(0.473g/kg),给药体积为1mL/100g体重,正常组和模型组灌胃给予同体积蒸馏水,每天一次,连续给药26天后,除正常组外,各组大鼠腹腔注射碱性生理盐水配制的PCPA(250mg/kg)进一步加深实验动物的失眠症状。分别测定大鼠的实时步态行为、自主活动、在高架十字迷宫和敞箱中的行为、戊巴比妥钠诱导睡眠的潜伏期和睡眠时间、直肠温度、血清中雌激素及相关激素水平、子宫系数和肾脏系数、下丘脑和皮层中去甲肾上腺素(Norepinephrine, NE),多巴胺(Dopamine, DA),5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT),5-羟吲哚乙酸(5-Hydroxyindole Acetic Acid,5-HIAA)的含量、下丘脑雌激素α受体(ERa)的表达水平。结果显示,与正常组相比,去势加PCPA致睡眠障碍模型大鼠的睡眠时间明显减少(P<0.05)；在敞箱、高架十字迷宫中的行为以及自主活动无明显改变(P>0.05)；实时步态行为发生明显改变,表现为步基减小,步宽增大,步幅减小,四肢足迹最大强度减少,右前相对于右后的同侧协调性降低,右前相对于左前的同源协调性降低,支撑时相增加,速度降低(P<0.05)；子宫系数、直肠温度和血清中FSH,催乳素(Prokctin, PRL)的水平明显降低(P<0.05)；下丘脑NE的含量明显升高,下丘脑5-HT、5-HIAA的含量和皮层中NE、5-HT、5-HIAA的含量及下丘脑ERa表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组大鼠比较,坤宝丸1.160g/kg组能显著延长大鼠的睡眠时间(P<0.05)；精乌胶囊0.945g/kg组能显著缩短模型大鼠的睡眠潜伏期(P<0.05)；坤宝丸1.160g/kg组、精乌胶囊0.945g/kg、0.473g/kg组能够明显增加模型大鼠的步基,精乌胶囊0.945g/kg组能明显增加模型大鼠的步幅,精乌胶囊0.473g/kg组能明显改善模型大鼠右前相对于左前(Rf-Lf)的同源协调性,坤宝丸1.160g/kg组还能明显改善模型大鼠右前相对于右后(Rf-Rh)的同侧协调性；坤宝丸1.160g/kg组能明显增加模型大鼠下丘脑5-HT.5-HIAA的含量及5-HT/DA的值,增加皮层NE含量及5-HT/NE,5-HT/DA的值,而精乌胶囊0.945g/kg组能够明显增加模型大鼠下丘脑NE和5-HT含量及5-HT/DA的值,精乌胶囊0.473g/kg组能明显增加模型大鼠下丘脑NE, DA、5-HT.5-HIAA的含量(P<0.05)；精乌胶囊1.890g/kg、0.945g/kg、0.473g/kg组均能显著增加模型大鼠皮层部位NE和5-HT的含量及5-HT/NE的值。精乌胶囊0.945g/kg、0.473g/kg组能明显增加模型大鼠血清GnRH水平(P<0.05)。精乌胶囊1.890g/kg.0.473g/kg组大鼠下丘脑ERa表达水平明显增加。各给药组对模型大鼠在敞箱和高架十字迷宫中的行为,自主活动次数以及子宫系数、肾脏系数无明显影响。提示精乌胶囊具有改善去势加PCPA大鼠睡眠障碍的作用,表现为加快入睡和改善失眠引起的步态变化,这些作用可能与调节下丘脑、皮层等中枢部位与睡眠相关的神经递质之间的平衡状态和雌激素受体表达以及改善潮热症状有关。综上所述,精乌胶囊对去卵巢小鼠模型和去势加PCPA大鼠模型的睡眠障碍有一定的治疗作用,对去势引起的激素水平变化未见明显调节作用,而可能与调节下丘脑、皮层等中枢部位的神经递质之间的平衡状态及雌激素受体表达有关。