【摘 要】
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我们的研究分为以下几部分.1、树鼩感染实验:为了进一步深入评价树鼩到底是否能作为HCV研究的动物模型,我们作了HCV感染树鼩的实验研究,初步探讨了HCV的基因型和感染剂量与树
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我们的研究分为以下几部分.1、树鼩感染实验:为了进一步深入评价树鼩到底是否能作为HCV研究的动物模型,我们作了HCV感染树鼩的实验研究,初步探讨了HCV的基因型和感染剂量与树鼩感染之间的关系.2、CD81分析:我们采用RT-PCR技术克隆了树鼩CD81基因的cDNA序列;通过测序和计算机分析,推导出了树鼩CD81蛋白全氨基酸序列,并与多种业已证明可被HCV感染和不能被HCV感染的动物的CD81 cDNA和氨基酸序列进行了相似性分析.3、MT2细胞感染实验:我们用不同亚型的HCV感染了MT2细胞系,研究HCV亚型和感染复数(MOI)与MT2感染性之间的关系.结果表明,HCV能够感染MT2细胞,在感染实验中,所用的几个不同的基因亚型(1b、2c、3a、3b、unkown)均能感染MT2细胞,这与树鼩感染实验中的结果相一致,说明感染性与基因亚型之间没有关系;MT2细胞感染实验中,不存在感染性血浆和非感染性血浆的区别,但感染存在最低感染MOI值.4、为了研究是否在HCV感染MT2细胞后,HCV的某些蛋白会影响其受体CD81的表达量的变化.我们用了SYBR green I荧光实时定量RT-PCR的方法.这个方法经过了我们的优化,利用四步法PCR,排除了引物二聚体的干扰,使其定量更加灵敏和准确.CD81相对定量结果表明,感染组和非感染组MT2细胞的CD81 mRNA相对表达量并没有明显的区别.
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