肝纤维化是威胁人类生命健康的重大疾病之一,尤其在发展中国家的发病率更高。肝纤维化是是由酗酒、肥胖及病毒等各种致病因素引起的肝结缔组织增生的病理生理过程,主要表现为肝脏纤维瘢痕的产生和胶原沉积。若得不到有效抑制,肝纤维化会进展为肝硬化,并进一步发展为肝癌。因此,探索肝纤维化的发生发展机制以及研发抑制肝纤维化的治疗策略为当务之急。肿瘤内皮标志物1（TEM1）是在纤维化疾病中特异性高表达的膜蛋白,其在成纤维细胞中的高表达可促进纤维化疾病的发生发展。生长阻滞特异性基因6（GAS6）在肝纤维化进展中发挥重要作用,然而其表达调控机制不清。在本研究中,我们在前期发现TEM1可调控GAS6表达的基础上,深入探讨TEM1调控GAS6表达的分子机制,进一步明确TEM1在肝纤维化进展中的作用,并检测TEM1抗体IgG78对成纤维细胞生物学特性的影响及其用于治疗小鼠肝纤维化的效果,为肝纤维化的诊断和治疗提供潜在的靶点和策略。方法:（1）利用包含正常人肝组织和肝纤维化相关疾病（肝炎及肝硬化）的组织芯片,通过免疫组化染色检测TEM1的表达情况,并分析其与疾病严重程度的相关性。利用CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型,通过qRT-PCR和Western blot检测肝组织中TEM1的表达,并通过免疫荧光双染色分析TEM1是否表达于肝星状细胞。（2）在成纤维细胞中下调TEM1的表达,利用qRT-PCR和Western blot在m RNA和蛋白水平验证TEM1对STAT6和GAS6的调控作用。在成纤维细胞中下调STAT6的表达,检测其对GAS6表达的调控作用;利用双荧光素酶报告基因实验检测STAT6是否可结合于GAS6启动子并诱导其表达。在成纤维细胞中过表达或下调TEM1的表达,检测其对α-SMA表达的影响,明确TEM1在肝纤维化中的作用。在成纤维细胞中下调TEM1或GAS6的表达,利用Transwell实验检测其对细胞迁移的影响。（3）利用针对TEM1的人源性全抗体IgG78处理成纤维细胞,利用CCK8染色实验检测细胞增殖,利用Transwell实验检测细胞迁移,利用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,并利用Western blot检测TEM1、GAS6及纤维化相关蛋白α-SMA和COL1A1的表达情况。（4）利用IgG78治疗小鼠肝纤维化模型,利用天狼猩红染色和马松染色检测胶原纤维的水平,利用免疫组化染色检测STAT6、GAS6、α-SMA及COL1A1的表达情况。此外,利用ELISA检测血清中GAS6的水平,分析IgG78对肝纤维化的抑制效果并分析可能的分子机制。结果:（1）TEM1在人和小鼠肝纤维化组织中的表达水平高于正常肝组织,且TEM1的阳性表达与肝纤维化的严重程度呈正相关,提示TEM1是肝纤维化的重要标志分子。免疫荧光双染色结果显示TEM1与肝星状细胞的标志物GFAP、α-SMA和Vimentin存在共定位,提示TEM1主要表达于肝星状细胞。（2）在成纤维细胞中下调TEM1的表达,STAT6和GAS6的表达也下调;STAT6可直接结合于GAS6的启动子区而促进其转录;下调STAT6的表达,GAS6的表达也下调。在成纤维细胞中过表达或下调TEM1的表达,α-SMA的表达也相应上调或下调。在成纤维细胞中下调TEM1或GAS6的表达,可显著抑制细胞迁移。（3）使用IgG78处理成纤维细胞,可抑制细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡,引起细胞周期的G1期阻滞,还可抑制成纤维细胞中TEM1、GAS6及纤维化相关蛋白α-SMA和COL1A1的表达。（4）IgG78治疗后,小鼠的肝纤维化程度显著降低;免疫组化染色结果显示IgG78治可有效抑制小鼠肝组织中STAT6、GAS6及纤维化相关蛋白α-SMA和COL1A1的表达。此外,IgG78治疗后小鼠血清中GAS6的水平也明显下降。结论:TEM1在肝纤维化进程中的表达逐渐升高,且TEM1主要表达于肝星状细胞,是肝纤维化发生发展过程中的重要调控分子。TEM1可通过在肝星状细胞中调控STAT6的表达而间接调控GAS6的表达,从而激活GAS6/AXL通路,进而促进成纤维细胞的增殖、迁移和活化。TEM1抗体IgG78可下调成纤维细胞中TEM1的表达,抑制成纤维细胞的增殖、迁移,诱导细胞凋亡,并引起细胞周期的G1期阻滞,并可抑制纤维化相关蛋白α-SMA和COL1A1的表达。IgG78可抑制小鼠的肝纤维化,抑制小鼠肝组织中STAT6、GAS6及纤维化相关蛋白α-SMA和COL1A1的表达,并抑制小鼠血清中GAS6的水平。这些结果进一步明确了TEM1可作为肝纤维化的有效治疗靶点,而TEM1抗体IgG78可作为一种潜在的治疗肝纤维化的候选药物。