随着时间生物学和时辰药理学研究的不断深入，逐渐认识到人体的许多生理现象如血压、心率、胃酸分泌、激素分泌以及某些疾病如心绞痛、高血压、哮喘、风湿性关节炎的发生发作均具有明显的节律性。以此为基础设计的脉冲释药系统根据疾病发作规律释放药物，通过按需给药达到最佳治疗。本文以茶碱为模型药制备一日口服1次的茶碱两次不等剂量脉冲释药微丸，两次释药时间分别是上午和晚上，剂量分别是35mg和65mg。采用紫外分光光度法，建立了茶碱制剂的含量和体外释放度的测定方法。经方法学验证，适用于该品体外控制。采用高效液相色谱法，建立了犬体内茶碱血药浓度的测定方法，方法回收率为87.16％。此法简便、灵敏、准确，可以满足体内分析的要求。本制剂由五部分组成：从内向外依次为载药丸芯、溶胀层、控释层、含药衣层、普通薄膜衣。载药丸芯通过挤出滚圆法制得。用流化床包衣技术，以水溶胀性材料交联羧甲基纤维素钠(CCNa)为内包衣溶胀层，乙基纤维素水分散体(Surelease(?)E-7-19010)为外包衣控释层制备第二次脉冲释药微丸，并考察溶胀层种类、溶胀层和控释层包衣增重、溶出介质pH值和微丸粒径等对药物释放的影响。研究结果表明溶胀层和控释层包衣增重和微丸粒径等对第二剂量脉冲释药微丸的释药时滞和释药速率均具有显著影响，但不受溶出介质pH值的影响；随着溶胀层厚度的增加，释药时滞有一定程度的缩短；控释层厚度增加，可显著延长时滞。根据以上结果，最终选择交联羧甲基纤维素钠(CCNa)作为溶胀层材料，Surelease作为控释层材料，采用全面试验设计对处方进行优化，得最优处方为：CCNa增重为28％，Surelease增重为30％。此处方的时滞为8h，时滞后3h释药达80％以上。质量考察结果表明，第二次脉冲释药微丸对高温、高湿敏感。对所制得的第二次脉冲释药微丸再进行包衣，即在其外层继续包上茶碱层和普通薄膜衣制备两次脉冲释药微丸。茶碱层含药量，即为第一次脉冲剂量，载药丸芯的含药量即为第二次脉冲剂量。考察了微丸中第一剂量茶碱的体外溶出度和含量均匀度及两次脉冲释药微丸体外溶出度。结果表明药层增重33.98％，薄膜衣增重3％，两次脉冲释药微丸中的第一脉冲释药在45min内能够达到理想的溶出度，其含量均匀度符合要求，第二剂量脉冲释药时滞为8.5h，时滞后3h释药达到80％以上。进一步的实验表明药层和普通薄膜衣对茶碱第二次脉冲释药速率几乎没有影响，只是时滞延长了0.5h。采用自身交叉给药方案对茶碱两次脉冲释药微丸(受试制剂)和市售缓释片(参比制剂)进行了犬体内药动学考察，结果表明茶碱两次脉冲释药微丸，其第一和第二次脉冲释药在体内时滞分别为0.5h和10.0h；释药达峰时间分别是1.5h和14h。相对生物利用度为110％。综上所述，制备茶碱两次脉冲定时释药微丸可行，且可以满足临床治疗的特殊需要。