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钛材具有优异力学性能和良好的生物相容性,被广泛应用于人工植入体领域。然而,钛材缺乏抗菌性能,且骨整合性较差,因此钛材植入体内后易引发术后感染、伤口愈合速度慢、炎症反应等严重问题。这些缺陷限制了钛材在植入体领域中的应用。 天蚕肽是一种最具潜力的抗生素替代品。相关研究表明,天蚕肽广泛地存在于各种昆虫及哺乳动物中,具有较高的抗菌活性与生物相容性。本文将天蚕肽B作为钛材表面涂层以提高钛材表面抗菌能力和钛材生物相容性。 本研究的主要内容包括: ①钛材表面天蚕肽B化学沉积及表征:生物化学法将天蚕肽化学吸附在以聚多巴胺为中间膜的钛材表面,分别利用场发射电子显微镜,原子力显微镜,X射线光电子能谱分析仪及水接触角测试仪对样本进行表征。 ②天蚕肽修饰的钛材表面抗菌能力评估:考察天蚕肽修饰的钛材表面对金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞杆菌,大肠杆菌及枯草芽孢杆菌抗菌能力。利用材料耐受性测试、激光共聚焦显微镜及场发射电子显微镜对材料表面抗菌能力进行评估。 ③天蚕肽修饰的钛材表面对成骨细胞作用评估:将成骨细胞接种到材料表面,使用CCK-8试剂检测细胞的增殖情况;利用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白与vinculin蛋白的表达,通过扫描电镜观察细胞的铺展状态,揭示其黏附情况;通过划痕测试对成骨细胞迁移能力进行考察;利用Western blot对成骨细胞的分化情况进行评价。 ④天蚕肽修饰的钛材表面对巨噬细胞炎症作用评价:将巨噬细胞接种到材料表面,使用CCK-8试剂检测巨噬细胞的增殖情况;利用激光共聚焦显微镜观察骨架蛋白,揭示巨噬细胞在材料表面黏附及激活情况;通过酶联免疫吸附剂测定实验检测巨噬细胞炎症因子的释放。 本研究结果表明:天蚕肽B成功沉积到钛材表面。抗菌测试表明天蚕肽B膜可以抑制钛材表面细菌生长。成骨细胞与巨噬细胞在天蚕肽 B修饰后的钛材表面响应结果表明天蚕肽B可以提高钛材表面生物相容性。