甜瓜(Cucumis melo L.)是一种重要的蔬菜作物,营养丰富,瓜味甜美,原产热带,我国各地普遍栽培。转基因操作是开展过量表达、RNAi等基因功能研究的基础。为此,本试验以甜瓜子叶为材料,获得了稳定的甜瓜再生体系,并对其由根癌农杆菌介导的遗传转化进行了研究,主要结果如下：1、甜瓜再生体系的建立：通过对种子发芽培养基、子叶诱芽培养基、苗龄、伸长培养基、生根培养基及驯化基质的研究,得出了甜瓜以子叶为外植体的最佳再生体系：去除种皮后置于1/2MS培养基中培养最适于种子发芽,最佳的芽诱导培养基为MS+1.0mg/L6-苄基腺嘌呤(6-BA),最适苗龄为4-5天,约28天后,再生芽转入最佳伸长培养基(MS+0.05 mg/L 6-BA+0.2 mg/L赤霉素(GA3))中培养,约14天后,将其转入最佳生根培养基(1/2MS+0.1 mg/L吲哚丁酸(IBA))中进行生根培养,约20天后,再生植株开始驯化,发现商品化基质(购于镇江兴农有机肥有限公司的蔬菜育苗基质)优于混合基质(草炭：蛭石：珍珠岩=2：1：1)。统计结果显示,整个再生过程需要62天左右。2、甜瓜子叶转化体系的建立：将苗龄5天子叶在上述最佳诱芽培养基上预培养1天(或苗龄4天子叶预培养2天),以LBA4404(含质粒pCAMBIA2301)菌液侵染后黑暗条件下共培养3天,转入选择培养基(最佳诱芽培养基+100 mg/L卡那霉素(Kan)+500 mg/L头孢霉素(Cef))在16小时光周期、27-C条件下培养,25天左右将抗性芽转入伸长培养基(MS+0.05 mg/L 6-BA+0.2 mg/LGA3+500mg/L Cef)中培养。抗性芽2 cm左右时转入生根培养基(1/2MS+0.1 mg/L IBA++200 mg/L羧苄青霉素(Carb)),获得抗性株系。结果显示,以子叶为外植体,从选择培养开始到转化苗生根需要60天左右。若以RT-PCR阳性作为判断最终转化成功的标准,子叶转化体系的转化率为0.62%。