海藻游离氨基酸的分析检测与非蛋白质氨基酸的分离纯化

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海藻是海洋中主要的低等海洋植物,是重要的海洋初级生产者,同时也是海洋天然活性物质的主要来源之一。海藻中广泛存在海洋毒素、萜类、甾体、脂肪酸、肽类、特殊氨基酸等活性化合物,这些活性成分是新药开发的重要来源。海藻的药用功效及其活性成分的研究长期以来受到国内外学者的重视。海藻在增强人体免疫调节、降血脂、抗肿瘤、抗氧化、抑菌消炎等方面具有广泛的药理作用。在特色海洋食品、新药开发、经济饵料方面具有良好前景。   本论文对六种海洋大型经济藻类和室内培养的多种海洋微藻的游离氨基酸进行测定分析。筛选含有未知组分的海藻,深入开展具有药用价值的微藻资源的发掘保藏、藻体活性物质的高效萃取和纯化的研究工作。本研究主要取得了以下成果:   1.建立了一种用异硫氰酸苯酯柱前衍生反相高效液相色谱测定藻类中17种游离氨基酸的方法,测定藻类中游离氨基酸的种类及含量,为研究藻类营养价值提供实验依据。方法:70%乙醇浸泡,过强酸型阳离子交换树脂,收集高浓度氨水洗脱液,浓缩后异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分析,测定藻类中各氨基酸峰面积并采用归一化法计算其含量。结果:各氨基酸均能依次分离,基线平稳。结论:PITC柱前衍生反相高效液相色谱法可作为藻类中游离氨基酸的测定手段之一。   2.对海藻氨基酸粗提液进行测定分析。不同海藻的氨基酸组成和比例基本相似,但也存在一定的种间差异。通过与混合标准氨基酸样品的保留时间及峰型对比定性,检测到海藻样品中除含有多种蛋白质氨基酸外还含有多种未知组分。对未知组分分离纯化收集,鉴定未知组分的结构,最终从铜藻中分离得到β-丙氨酸。   3.带形蜈蚣藻甲醇浸提液,真空冷冻浓缩,经过各离子交换树脂分离纯化,薄层层析和RP-HPLC检测分析,最终得到一定纯度的非蛋白质氨基酸粗提品。  
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