青天葵为兰科芋兰属植物毛唇芋兰Nervilia fordii (Hance) Schltr.的干燥叶或带块茎的叶。具有清热润肺止咳,解毒散瘀止痛的功效,主要用于治疗肺部疾病。临床上常与其他中药联合应用,如天龙茶、天龙咳喘灵胶囊等,在治疗哮喘、急性支气管炎、喘息型慢性支气管炎方面效果显著。主产于广西、广东和海南,四川、云南、泰国亦有分布,由于青天葵资源分布有限,自然繁殖率极低,加之乱采乱挖,野生资源日益枯竭,合理开发青天葵资源已十分必要。在商品规格上,青天葵按叶片大小分为大叶、中叶、小叶三种,民间亦有用芋兰属植物毛叶芋兰Nervilia plicata (Andr.) Schltr.代替青天葵药用,称作毛叶青天葵。目前法定的标准中仅有广东省中药材标准对青天葵药材的质量控制作出了相关规定。以往的研究对其进行质量分析时,仅以水溶性浸出物、醇溶性浸出物的含量为标准,难以全面的评价青天葵质量。针对青天葵的研究现状,本论文从化学成分和质量分析两方面对青天葵药材进行研究。在化学成分研究的基础上,建立了多种黄酮成分定量分析及HPLC、TLC指纹图谱定性鉴别的方法,以期能够为青天葵资源的有效、合理开发和质量评价提供科学依据。研究内容包括青天葵化学成分的系统分离、主要成分的含量测定、HPLC指纹图谱鉴别和TLC指纹图谱鉴别研究。研究结果如下：1.本论文运用多种色谱方法和波谱技术,从青天葵甲醇提取物中分离并鉴定了14个化合物的结构。分别为：Dihydrocycloeucalenol (NF-PE-1)、豆甾醇(stigmaterol) (NF-PE-2)、鼠李素(rhamnetin) (NF-PE-3)、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(stigmasterol-3-O-β-D-glucoside)(NF-PE-4)、酵母甾醇(cerevisterol) (NF-PE-5)、鼠李秦素(rhamnazin) (NF-EtOAc-1)、鼠李柠檬素(rhamnocitrin) (NF-EtOAc-2)、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷(rhamnazin-3-O-β-D-glucoside) (NF-EtOAc-3)、鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(nervilifordizin A)(NF-EtOAc-4)、鼠李柠檬素-4’-O-β-D-葡萄糖苷(rhamnocitrin-4’-O-β-D-glucoside) (NF-BuOH-1)、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(nervilifor dizin B)(NF-BuOH-2)、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(rhamnocitrin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1-4)-β-D-glucopyranoside(NF-BuOH-3)、4’-O-β-D-葡萄糖鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(nervilifordizin C)(NF-BuOH-4)、沙苑子苷(complanatuoside) (NF-BuOH-5)。其中化合物NF-EtOAc-4、NF-BuOH-2和NF-BuOH-4为新化合物,化合物NF-PE-4和NF-PE-1为首次从该植物中分离得到。通过化学成分研究发现,青天葵中主要化学成分为黄酮类化合物。2.研究青天葵的TLC指纹图谱测定方法,对包括9批大叶青天葵和6批中叶青天葵在内的青天葵样品(全草)和5批毛叶青天葵样品进行了TLC指纹图谱研究,分别建立了大叶、中叶和毛叶青天葵的化学成分TLC指纹图谱。大叶、中叶和毛叶青天葵分别指认出3个共有峰,与对照品进行比对,可确定其中的5个指纹峰Rf值由小到大)分别为4’-O-β-D-葡萄糖鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(2#)、沙苑子苷(3#)、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(4#)、鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(5#)、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷(7#)。用CHROMAP 1.51色谱指纹图谱分析系统解决方案软件将薄层指纹图像转化成轮廓曲线图，并生成共有模式图,结果毛叶青天葵Ⅱ区无4、5、6、7号峰,而大叶及中叶青天葵Ⅱ区有全部或部分4、5、6、7号峰。因此利用TLC指纹图谱可以对青天葵药材进行质量评价,并且将青天葵和毛叶青天葵这两个不同植物来源的药材区别开来。3.采用HPLC方法,以乙腈-0.2%磷酸为流动相进行梯度洗脱,对包括9批大叶青天葵和6批中叶青天葵在内的青天葵样品(全草)和5批毛叶青天葵样品进行了指纹图谱分析研究,分别建立了大叶青天葵、中叶青天葵和毛叶青天葵的化学成分HPLC指纹图谱。大叶、中叶和毛叶青天葵分别指认出9个共有峰,与对照品进行比对,可确定其中的9个指纹峰(保留时间由小到大)分别为沙苑子苷(7#)、4’-O-β-D-葡萄糖鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(8#)、鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(9#)、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(10#)、鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(12#)、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷(13#)、鼠李素(15#)、鼠李柠檬素(16#)、鼠李秦素(17#)。将大叶、中叶及毛叶青天葵三者的对照指纹图谱导入计算机软件,进行相似度评价,发现大叶青天葵(毛唇芋兰)、中叶青天葵(毛唇芋兰)相似度分别为0.980和0.967；而毛叶青天葵(毛叶芋兰)相似度为0.863。前两者与后者的区别主要在于：毛叶青天葵对照指纹图谱中无9、10、11、12、13号色谱峰,而这些峰在大叶和中叶青天葵中同时存在。因此,可利用这些特征峰有效的将青天葵和毛叶青天葵区别开来。液相指纹与薄层指纹均能作为鉴别青天葵药材真伪的方法。相比之下,液相指纹检测灵敏度及分离效率更高,尤其表现在对大极性成分的分离方面,且全程在线操作,自动化程度高。而薄层指纹则能够形成形象直观的色彩谱图,提示显色斑点的化学归属,能将多个样品信息在同一薄层板上展示出来,展开系统的组成亦较灵活多样。两种方法各有优缺点,应用时可根据试验需要和实际情况选择。4.本论文采用HPLC法,建立了同时测定青天葵和毛叶青天葵中7种成分含量的方法。实验结果表明在鉴别两种芋兰属植物时,可选取鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷和鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷作为指标成分以区分青天葵与毛叶青天葵。以上4种成分在毛叶青天葵中均未检测到,而青天葵样品中则含有全部或部分以上4成分。根据测定结果,建议以上4种成分的含量应不得低于0.064 mg·g-1,0.033 mg·g-1,0.080 mg·g-1和0.030 mg·g-1。15个批次的青天葵药材中,鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→04)-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷、鼠李素、鼠李柠檬素和鼠李秦素的含量范围分别为0.064～0.733 mg·g-1,0.033～1.165 mg·g-1,0.080～2.721 mg·g-1,0.030～1.390 mg·g-1,0.044～0.584 mg·g-1,0.098～3.698 mg·g-1,0.047～1.870 mg·g-1。各成分在青天葵中的含量波动较大,相比之下,7种成分含量之和的RSD值较小,且各成分的化学结构相似,在植物代谢方面可能有着互相承接的关系,因此本文建议将7种成分总含量作为指标之一来评价青天葵药材质量优劣。7个黄酮总含量应不得低于2.1 mg。本文对青天葵化学成分的系统分离研究,丰富了青天葵化学成分研究方面的内容。质量评价采取指纹图谱与多指标成分定量相结合的体系,同时体现了中药材的整体特征和个体特征,得以更好的控制药材质量,可以为该药的后续质量标准研究提供实验参考依据。