核桃楸青龙衣中四种成分的研究

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由于青龙衣所独具的生物活性,近年来青龙衣的研究与开发越来越引起科研工作者的广泛关注。本课题对核桃楸青龙衣中四种活性成分进行了初步研究,对其中胡桃醌、多糖、黄酮和鞣质四种成分进行了提取工艺的优化,对胡桃醌和鞣质这两种不稳定物质进行了稳定性研究,并验证了提取胡桃醌最佳保存材料的条件,对黄酮和多糖进行了提取纯化工艺的初探。并验证了黄酮的生物活性。结果如下:1胡桃醌最佳提取溶剂为乙酸乙酯,料液比1:20,提取时间为30min,提取温度设为25℃。各因素对提取率的影响顺序是固液比>提取时间>提取温度。最佳条件下胡桃醌平均提取率为0.404%。青龙衣药材宜采用阴干或低于50℃烘干的方法干燥;不宜长期贮藏,应尽量使用当年的药材进行临床应用或抗肿瘤实验的研究;宜在当年7-8月份果实未成熟时采收。胡桃醌应在低温、避光、弱酸性条件下保存。2青龙衣多糖最佳提取工艺为:料液比为1:40,提取时间为1.5h,提取温度70℃时,青龙衣多糖的提取率最高。各因子对提取率的影响顺序为:提取温度>提取时间>料液比。平均得率12.54%。最佳醇沉方案为采用无水乙醇进行一次沉淀。应采用TCA法结合蛋白酶法以期充分除去杂蛋白来提纯多糖。脱色最佳方法为H202氧化脱色法。3青龙衣总黄酮最佳提取工艺为:乙醇浓度为30%,提取时间60min,提取温度60℃,料液比为1:30时,青龙衣总黄酮的提取率最高。各因素对提取率的影响顺序是提取时间>乙醇浓度>提取温度>料液比。该工艺条件下,总黄酮平均提取率为2.64%。本实验用萃取法结合D101大孔树脂柱层析法对核桃楸青龙衣总黄酮进行分离效果最佳。青龙衣黄酮对各种菌的最小抑菌浓度依次为:金黄色葡萄球菌50mg/mL、大肠杆菌50mg/mL、枯草芽孢杆菌25mg/mL、产气杆菌25mg/mL。通过青龙衣总黄酮溶液对羟自由基(·OH)的清除和超氧自由基(02-·)的抑制试验可得出,青龙衣总黄酮在一定程度上可以减缓机体遭到自由基的破坏。4青龙衣总鞣质最佳提取工艺为:丙酮浓度为50%,料液比为1:30,水浴时间3h,温度为60℃。各因素对浓度的影响顺序是丙酮浓度>料液比>提取时间>提取温度。该工艺条件下,鞣质平均提取率为1.67%。鞣质需在4℃低温下,避光保存在pH=5-6的微酸性环境中。应先将青龙衣提取物经明胶沉淀纯化,再反复用乙酸乙酯萃取,来加强青龙衣总鞣质的纯化效果,提高收率。生物活性实验证明了青龙衣鞣质有一定的还原力,以及较强的抗脂质过氧化活性。
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