【摘 要】
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目的:构建人内皮抑素(endostatin)克隆载体及人内皮抑素表达载体PQE-30-Endostatin,进行序列测定,并把其作用于小鼠人宫颈癌肾包膜下移植瘤模型,检测其对小鼠人宫颈癌移植瘤
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目的:构建人内皮抑素(endostatin)克隆载体及人内皮抑素表达载体PQE-30-Endostatin,进行序列测定,并把其作用于小鼠人宫颈癌肾包膜下移植瘤模型,检测其对小鼠人宫颈癌移植瘤生长和新生血管形成的作用.方法:用RT-PCR方法从引产新鲜人胚肝脏中钓取endostatin全编码区cDNA.分离纯化,将该片段重组于pGEM-T Easy克隆载体后,重组载体被限制性内切酶酶切鉴定.从克隆载体pGEM-T Easy中,将人内皮抑素cDNA亚克隆入真核表达载体pQE-30,构建含人内皮抑素cDNA的重组质粒;进行DNA序列分析后将该重组质粒转化入大肠杆菌TG<,1>中大量扩增,提取质粒;同时通过人宫颈癌组织小鼠肾包膜下埋植建立Babl/c小鼠宫颈癌模型,并把表达质粒纯化后作用于小鼠,通过宫颈癌组织的体积大小变化、血管密度及内皮抑素表达率等指标检测评价其对人宫颈癌小鼠移植瘤生长和新生血管形成抑制作用.
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