【摘 要】
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DNA是生命的信息、遗传中心,同时也是电离辐射的关键靶,维持DNA序列、结构的完整性和遗传稳定性,是细胞的中心事件,并形成ATM、ATR为核心的DNA辐射损伤监控和应激网络。micro
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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DNA是生命的信息、遗传中心,同时也是电离辐射的关键靶,维持DNA序列、结构的完整性和遗传稳定性,是细胞的中心事件,并形成ATM、ATR为核心的DNA辐射损伤监控和应激网络。microRNA(m-RNA)是一类新的调控因子,其表达的时空特异性、调控方式的多样性和灵活性,使其成为信使RNA强有力的调节子。miRNA层面上研究DNA辐射损伤修复调控机理,将丰富DNA辐射损伤修复理论,具有重大的理论和应用价值。该方面的研究刚起步,有很多未知领域等待探索。
通过对辐照后临床组织样本的miRNA芯片数据分析,发现辐照后miR-185的表达显著下降;通过荧光定量PCR检验,发现辐照后组织和细胞系中miR-185的下调表达具有普遍性;通过miRanda、RNA22等靶基因预测软件分析,确定ATR为miR-185调控的潜在靶基因;通过Western blot、qRT-PCR实验,证明miR-185抑制ATR基因的表达:从而显著性地提高了细胞的辐射敏感性(凋亡比率升高,克隆存活率下降),并检测到miR-185可以直接抑制移植瘤的生长。
ATR是DNA辐射损伤修复关键蛋白激酶,本课题首次发现miR-185通过抑制ATR基因的表达,调控DNA辐射损伤修复。该结果的发现,一方面在miRNA层面上丰富了DNA辐射损伤修复调控机制,另一方面为miR-185在肿瘤诊断、放疗靶点、放疗联合基因治疗等方面的潜在应用,奠定了理论基础。
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