板蓝根多糖的提取及其免疫调节作用研究

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板蓝根多糖是板蓝根中含量较多的一种活性多糖,约占板蓝根总质量的12%,具有提高机体免疫力、清除体内自由基、抗菌抗病毒等多种生物功效。但目前板蓝根各种药剂生产工艺中,往往把板蓝根制药残渣视为废品,药渣中尚还有大量的板蓝根多糖未有效利用,造成资源的浪费。本文意在从板蓝根制药残渣中提取多糖,得到提取的最佳工艺条件,并以简便方法测定多糖的分子量分布范围,研究板蓝根多糖对免疫抑制小鼠免疫调节作用影响。本研究首先对板蓝根粉末进行石油醚脱脂、95%乙醇多次回流浸提得到模拟板蓝根制药残渣,醚溶和醇溶物质各占1.17%和5.07%。采用单因素和正交试验研究了浸提时间、浸提温度、浸提次数对水提板蓝根多糖的影响,研究结果为:在水浴温度95℃下提取4次,每次2h,该条件下得到的多糖得率为16.43%。实验以醋酸铅作为沉淀剂对多糖水提液进行除杂脱色,再以中空纤维膜对其进行分级分离,用苯酚-硫酸法测定各级分离液中多糖含量,进而求得多糖分子量分布范围。实验测得板蓝根多糖液浓度为37.392mg/mL,分子量在1×10~4g/mol~1×10~5g/mol范围的质量分数为90.8%,板蓝根多糖分子量主要分布在2×10~4g/mol~5×10~4g/mol。用该法测得板蓝根多糖分子量分布数据可靠,避免了反复分离、提纯带来的繁琐操作和实验误差。将试验小鼠分为对照组、模型组和剂量(低、中、高)组,建立免疫抑制模型。对照组、模型组饲喂基础饲料,剂量组分别饲喂含不同板蓝根粗多糖的饲料。6周后测小鼠血常规指标、脏体比、血清中白介素-2及肿瘤坏死因子-α的含量。结果表明,免疫抑制小鼠的白/红细胞数、血小板数和血红蛋白值均随粗多糖剂量的增加而增大;体增重对照组最大,低、中、高剂量组和模型组依次递减;各剂量组脏体比均明显小于对照组;各剂量组小鼠血清中IL-2和TNF-α水平均显著上升。说明板蓝根粗多糖能提升小鼠免疫功能,但对小鼠的发育有一定影响。
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