肾细胞癌中Wif-1基因启动子区甲基化状态与mRNA表达的研究

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目的:Wif-1(Wnt inhibitory factor-1,Wif-1)是Wnt信号转导通路的一个重要抑制因子,国内外大量实验发现在众多恶性肿瘤中存在Wif-1的表达异常或启动子区的高甲基化,提示启动子区的高甲基化可能是肿瘤发生机制之一。但是该基因在肾细胞癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)中的研究较少,本实验通过应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific PCR,MSP)和逆转录-聚合酶链反应(ReverseTranscriptase-PCR,RT-PCR)探讨RCC组织及正常肾组织中Wif-1基因启动子甲基化状态与mRNA表达水平,并研究它们与临床资料之间的关系,为RCC的发病机制、临床诊断及治疗提供一定的理论依据。方法:1应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific PCR,MSP)检测56例RCC组织及正常肾组织中Wif-1基因甲基化状态,并分析该基因甲基化在RCC发生发展中的作用以及与临床资料之间的关系。2应用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcriptase-PCR,RT-PCR)技术检测Wif-1基因mRNA在56例RCC组织及正常肾组织中的相对表达量,并分析在RCC组织中Wif-1基因mRNA相对表达量与临床资料之间的关系。3应用统计软件SPSS17.0对数据进行统计学分析。结果:156例RCC组织和56例正常肾组织中Wif-1基因启动子的甲基化情况以及RCC组织中甲基化与临床资料之间的研究。Wif-1基因在RCC组织甲基化率分别是46.4%(26/56)明显高于正常肾组织的甲基化率3.6%(2/56),P<0.05,差异具有统计学意义。但是Wif-1的甲基化率与性别、年龄、临床分期及肿瘤大小等临床资料无明显关系。256例RCC组织和56例正常肾组织中Wif-1基因mRNA相对表达量情况,以及RCC组织中Wif-1基因mRNA相对表达量与临床资料之间的关系。Wif-1基因mRNA在RCC组织中的相对表达量0.65±0.17低于正常肾组织mRNA的相对表达量0.77±0.06,经统计学分析,P<0.05,两组差异有意义。但是Wif-1基因mRNA相对表达量与年龄、性别、肿瘤大小等临床资料无统计学意义。3在RCC组织中,Wif-1基因mRNA的相对表达量在甲基化阳性病例中为0.68±0.17高于甲基化阴性病例中mRNA的相对表达量0.63±0.17,P>0.05,但是差异无统计学意义。结论:1RCC组织中Wif-1基因的甲基化率46.4%(26/56)明显高于正常肾组织的甲基化率3.6%(2/56),经统计学分析,P<0.05,两组甲基化率的差异有意义,该研究提示Wif-1基因启动子区的高甲基化在RCC的发生中是一个常见事件,并且可能参与RCC的发生。2Wif-1基因mRNA在RCC组织中的相对表达量0.65±0.17低于正常肾组织中的相对表达量0.77±0.06,经统计学分析,P<0.05,提示Wif-1基因mRNA表达的降低可能参与RCC的发生发展过程。3在RCC组织中,Wif-1基因mRNA的相对表达量在甲基化阳性病例中为0.68±0.17高于甲基化阴性病例中mRNA的相对表达量0.63±0.17,P>0.05,但是差异无统计学意义,提示Wif-1基因启动子高甲基化可能只是RCC中的一个常见事件,而不会导致其mRNA表达的降低,其表达降低的具体原因有待进一步研究。
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