论文部分内容阅读
白木香（Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg）为瑞香科（Thymelaeaceae）沉香属（Aquilaria）植物,是我国的主要产香树种和经济树种,经济价值和药用价值极高;但在自然条件下未受到伤害的白木香基本不会产生沉香,而利用传统的结香方法,沉香的形成周期太过于漫长。因此,本研究从白木香已结香部位筛选出能促进白木香结香的内生促结香真菌,利用单因素发酵试验确定其最适的生长条件,并将促结香真菌与氯化钠等试剂进行复配制成真菌促结香诱导剂,在通过诱导剂引起的防御反应和树体颜色变化筛选出高效促结香真菌诱导剂,从而达到绿色高效结香的目的,为沉香产业可持续性发展提供科学依据和理论基础。主要研究成果汇报如下:（1）沉香内生促结香真菌筛选与鉴定本研究从已结香的沉香木质部中初步分离出内生真菌34株,初步分为9属15种2个未分类真菌,通过活体复筛出对树体侵染效果最好的6种促结香真菌（CX-1-1、CX-G-3-2、CX-1-2、CX-G-2-2、CX-1-5 和 CX-C3-1）。对该 6 种促结香真菌进行了生长速率的测定、形态学观察以及三基因分子鉴定,鉴定结果表明:CX-1-1为Fusarium oxysporum（尖孢镰刀菌）、CX-1-2 为Fusarium fujikuroi（藤仓镰刀菌）、CX-G-2-2 为Fusarium proliferatum（层出镰刀菌）、CX-G-3-2 为Fusarium solani（腐皮镰刀菌）、C-X-1-5为Lasiodiplodia pseudotheobromae（假可可毛色二孢）和 CX-C3-1 为Lasiodiplodia theobromae（可可毛色二孢）。（2）沉香促结香真菌发酵培养条件的优化通过单因素试验分别对6种促结香真菌进行发酵优化,结果得到:镰刀菌属和毛色二孢属的最佳培养天数为4d和9d;光照条件结果显示,尖孢镰刀菌（F.oxysporum）、层出镰刀菌（F.proliferatum）、假可可毛色二孢（L.psewdotheobromae）和可可毛色二孢（L.theobromae）这4株促结香真菌在光照和黑暗的轮换下产孢量达到最多,而藤仓赤霉菌（F.fujikuroi）和腐皮镰刀菌（F.solani）产孢量最多是在全天光照的培养条件下。镰刀菌属和毛色二孢属促结香真菌最适温度分别为28℃和30℃;促结香真菌更偏爱碱性生长环境,培养基最适初始pH值为8,促结香真菌最适摇床转速为180 r/min或200 r/min,;NaCl和CaC12物质添加量最佳浓度为4%;沉香诱导底物在6%添加量浓度时效果最佳。（3）促结香真菌诱导剂研制及应用将6种互不拮抗的促结香真菌与NaCl和CaC12物质分别研制成3种配比不同的诱导剂。在白木香接种不同诱导剂处理后,处理组3（F.solani:F.fujikuroi:F oxysporum:F.proliferatum:L.pseudotheobromae:L.theobromae=1:1:1:1:1:1）引起白木香树体的防御反应酶活最明显,在第7 d时达到峰值,PAL活性为44.7U·g-1·min-1,POD 酶活为 871.3 U·g-1·min-1,SOD 为 568 U·g-1·min-1,MDA 含量为 16.4 mmol·g-1。褐色变化范围为处理3>处理2>处理1>CK;并将褐色物质进行燃烧发现,冒白烟并伴有一定甜香味;确定最佳的沉香诱导剂组合为处理组3。利用处理3加量处理5个月后对褐色变化木材的显微结果显示:沉香为散孔材,生长年轮不明显;内涵韧皮部较多,为岛屿状,分布较为均匀,且颜色较深为黑色或者褐色,木射线和部分导管中有黄褐色油状物质的积累;导管的横切面为卵圆形、圆形或多角不规则形状,3-4个并列,木纤维多为4-6角的多角形,薄壁较薄;木射线细胞较长,横切面主要为单细胞的单列射线,有少数木射线分布在导管的四周;但在导管和木射线中未观察到侵填体和晶体。褐色变化木材的醇溶性浸出物染色鉴定结果显示为樱红色。