EGCG实验条件的探索以及EGCG对胰岛素受体的激活作用

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茶是世界上最受欢迎的饮品之一,人类饮茶有上千年的历史。饮茶对健康有诸多益处,如抗氧化、抗衰老、抗菌、抗病毒、抗肿瘤和降低多种疾病发病率等。研究发现,茶叶中多种组分都具有保健作用,其中以茶多酚为代表的多酚类物质在生命过程中起着非常重要的作用而被称为第八营养素。茶多酚中的最主要成分是(-)表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-Epigallo-catechin-3-gallate,EGCG),是最具有生物学效应的功能性成分。EGCG的研究者众多,报道的生物学效应与机理存在着许多矛盾的内容与结果。重要原因之一是EGCG在体外培养的单纯条件下极其不稳定,培养条件的轻微变化都会影响EGCG的半衰期,伴随着EGCG氧化会产生EGCG多聚物和过氧化氢,在中性培养条件下EGCG半衰期不足30分钟。这很有可能是之前报道存在矛盾的主要原因,一部分体外条件下EGCG发挥的生物学效应,很可能不是由EGCG直接触发,而是由其氧化过程所介导。本文描述的EGCG对ERK1/2激活作用以及对P12细胞的促凋亡作用,就是由于EGCG氧化后所产生的结果。因此,在常规条件下对EGCG进行体外的机理研究不足以完全解释其在临床上的保健作用。要想阐明EGCG本身的生理作用,就需要保持EGCG有效浓度,阻止EGCG氧化发挥非特异性作用。本研究探索了适用于EGCG体外实验的各种因素,得到了使EGCG半衰期延长至24小时以上的实验条件。在此条件下本文对EGCG的作用重新评估,发现EGCG可以促进胰岛素磷酸化,并通过生物膜干涉技术(biolayer interferometry,BLI)实验,证明体外条件下稳定的EGCG可以与胰岛素受体结合。上述研究结果为重新诠释EGCG降血糖的分子机理提供可能,为EGCG在医疗保健方面的应用提供了理论基础和新鲜切入点。
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