外源褪黑素调控采后葡萄酚类物质代谢机制研究

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植物褪黑素(Melatonin,MLT)作为植物体内的一种多效分子,不仅具有强大的自由基清除能力,而且具有一系列细胞和生理作用。近年来,外源褪黑素处理作为一种新型采后处理方式,受到了学者们的广泛关注。本文采用200μM和400μM外源MLT溶液浸泡采后巨峰葡萄(Vitis vinifera cv.Kyoho)25 min,然后于4℃贮藏25天。在贮藏期间测定葡萄的理化品质和抗氧化性,采用定量蛋白质组学技术分析蛋白质表达水平的变化,测定葡萄中酚类化合物、内源MLT及其前体物质含量,并对其关键基因表达水平进行q RT-PCR验证。实验结果如下:外源200μM和400μM褪黑素处理分别显著降低葡萄落粒率35.89%和36.89%,降低葡萄腐烂率58.37%和59.07%(p<0.05);促进可溶性固形物含量的上升,维持较高有机酸含量;促进了葡萄皮中氨基酸的积累;分别提升总酚含量14.34%和18.51%,总黄酮含量28.04%和36.45%,总花色苷含量38.11%和30.06%,提升抗氧化能力。同位素标记定量蛋白质组学研究发现,MLT上调了4个莽草酸途径关键酶、7个酚类物质合成关键酶,同时促进多胺合成、能量代谢和抗氧化系统等相关蛋白的表达,抑制脂肪酸代谢中脂肪链延伸相关酶表达。此外,外源褪黑素处理上调了MLT合成关键基因的表达,尤其是Vv ASMT3表达量提高至对照组的11.66倍,提高了葡萄内源MLT及其合成中间产物含量水平。q RTPCR验证表明,200μM外源褪黑素处理组上调Vv PAL表达83.82%,提高类黄酮代谢中Vv CHI、Vv F3H1、Vv F3H2、Vv F3’H、Vv LAR、Vv ANR和Vv OMT等基因的表达水平,显著提高了咖啡酰酒石酸、原花青素多聚体以及芍药色素和锦葵素类花色苷等酚类物质含量。研究结果表明,外源MLT处理促进了葡萄芳香族氨基酸合成,为酚类物质合成提供了充分的前体物质,同时上调酚类物质合成关键基因的表达,提高关键酶的表达水平,促进了葡萄贮藏期间酚类物质的积累。这为外源MLT处理对葡萄的酚类物质调控提供了理论基础,为外源MLT在葡萄采后处理的应用提供了重要的实践经验。
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