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本研究以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis河蟹)为对象,用不同比例的棉籽粕替代河蟹饲料中的其它植物蛋白源,同时,在基础饲料中添加不同浓度的醋酸棉酚,研究并评价了替代饲料和醋酸棉酚含量对河蟹生长、体成分、消化酶活力以及肠道和肝胰腺的显微和超微结构方面的影响,研究结果可为河蟹饲料蛋白源开发和水产养殖提供基础资料。研究结果如下:
1.不同棉籽粕水平饲料对中华绒螯蟹幼蟹生长和相关生理生化指标的影响
1.1不同棉籽粕水平饲料对中华绒螯蟹幼蟹生长和成活率的影响
根据已报道的中华绒螯蟹的营养需要,试验设计了4种等氮(40%)、等能(391kcal/100g)饲料。对照组(鱼粉饲料组,FM)含64.4%鱼粉,其它3种饲料分别按照等量蛋白替代原则以混合植物蛋白源替代78%的鱼粉,其中棉粕含量分别为20%(CSM200)、40%(CSM400)、66%(CSM660)。结果表明,添加棉籽粕的处理组河蟹的成活率、特定生长率(Specific growth rate SGR)和蛋白质效率(Protein efficiency ratioPER)显著低于FM对照组(P<0.05),并且随着棉籽粕含量的升高,其特定生长率显著降低(P<0.05),相应地,各试验组的饲料系数(Feed conversion ratio FCR)显著高于FM对照组(P<0.05),其中,各试验组的饲料系数没有显著差异,即各试验组的饲料系数并没有随着棉籽粕水平的升高而显著降低(P>0.05)。蟹体成分的分析结果,水分含量在不同投喂组之间并没有显著差异(P>0.05);FM对照组河蟹幼蟹体内的灰分显著低于棉籽粕添加组CSM660的灰分(P<0.05);而蟹体的粗蛋白高于不同棉籽粕含量添加组,但只与CSM660处理组之间存在显著性差异(P<0.05)。
1.2不同棉籽粕水平饲料对中华绒螯蟹幼蟹蛋白酶的影响
以鱼粉组饲料(FM)为对照组,研究了饲料中不同含量的棉籽粕对河蟹肠道、肝胰腺胰蛋白酶活力的影响。结果显示:投喂不同水平棉籽粕饲料后,FM对照组河蟹肠道的胰蛋白酶活力最高(138.32±11.81 U.mg-1prot.-1),经统计处理,对照组FM、处理组CSM200 CSM400,三组之间无显著性差异(P>0.05),但CSM660与这三组均有显著性差异(P<0.05)。FM对照组河蟹肝胰腺的胰蛋白酶活力最高(421.18±3.59 U.mg-1prot.-1),经统计处理,除了CSM200组和CSM400组之间没有显著性差异外(P>0.05),其余各组之间均有显著性差异(P<0.05);FM对照组河蟹的肠道和肝胰腺胃蛋白酶活力分别为(12.19±0.12U.mg-1 prot.-1)和(8.59±0.74 U.mg-1prot.-1)均高于处理组,但经统计处理,各组之间无显著性差异(P>0.05)。
1.3中华绒螯蟹幼蟹对不同棉籽粕水平饲料的表观消化率
试验以鱼粉蛋白饲料为对照组,研究了河蟹对不同水平棉籽粕饲料的表观消化率。测定结果显示:投喂不同含量棉籽粕的饲料后,河蟹对FM对照组饲料干物质的表观消化率为62.85±0.49%,显著高于其他各处理组(P<0.05)。经统计处理,除了CSM400和CSM660处理组之间没有显著性差异外(P>0.05),其它各组之间均有显著性差异(P<0.05);河蟹对FM对照组饲料中蛋白质的表观消化率为79.54±0.30%,显著高于处理组(P<0.05)。统计分析显示,各试验组间均有显著性差异(P<0.05)。
1.4不同棉籽粕水平饲料对中华绒螯蟹幼蟹肠道和肝胰腺组织结构的影响
对河蟹肠道和肝胰腺超微结构的研究结果表明,用添加了棉籽粕的饲料投喂10周后,河蟹肝胰腺细胞内的细胞器受到损伤:线粒体内的嵴减少或消失呈膨大状;溶酶体增加;内质网膨大,多为光面内质网;内膜结构紊乱;核膜溶解并内陷,核物质外溢。河蟹肠道的粘膜皱襞增多且不饱满,微绒毛稀疏。对河蟹肝胰腺显微结构的研究结果表明处理组幼蟹肝胰腺的部分细胞解体,基膜不完整,管腔内出现细胞碎片;液泡体积很大并明显增多。
2.醋酸棉酚对中华绒螯蟹幼蟹生长和相关生理生化指标的影响
2.1醋酸棉酚对中华绒螯蟹幼蟹生长和成活率的影响
为探讨饲料中的棉酚含量对河蟹生长和成活率的影响,试验设计了4种等氮(40%)、等能(391kcal/100g)饲料。对照组(FG0)和处理组主要营养物质含量都相等,在处理组饲料分别添加144 mg.kg~(FG144),288 mg.kg-1(FG288),474 mg.kg-1(FG474)醋酸棉酚。结果显示,投喂不同水平醋酸棉酚饲料后,FG0对照组河蟹的成活率最高(68.89±1.81%),显著高于FG288和FG474(P<0.05)。并且FG0对照组的特定生长率和蛋白质效率均显著高于处理组(P<0.05),随着棉酚含量的增加,处理组的特定生长率和蛋白质效率呈降低之势。同时FG0对照组的饲料系数显著低于处理组(P<0.05),随着棉酚含量的增加,处理组的饲料系数呈升高之势。水分,粗蛋白和粗脂肪含量在不同投喂组之间,随着棉酚含量的增加而呈降低之势,但并没有显著差异(P>0.05)。但是,全蟹体内的灰分含量,FG0对照组显著低于处理组,并且随着棉酚含量的增加而呈显著升高之势(P<0.05)。
2.2醋酸棉酚对中华绒螯蟹幼蟹蛋白酶的影响
醋酸棉酚对河蟹幼蟹蛋白酶影响的试验结果表明,FG0对照组河蟹肝胰腺的胰蛋白酶活力(366.11±5.69 U.mg-1prot.-1)和胃蛋白酶活力(8.54±0.48 U.mg-1prot.-1)均高于处理组,并显著高于处理组FG474(P<0.05),同时随着醋酸棉酚在饲料含量中的升高,胰蛋白酶活力和胃蛋白酶活力呈降低之势,但各处理组之间差异不显著(P>0.05);FG0对照组河蟹肠道的胰蛋白酶活力(136.04±7.82 U.mg-1prot.-1)和胃蛋白酶活力(12.22±0.12 U.mg-1prot.-1)均高于处理组,但经统计处理,各组之间无显著性差异(p>0.05)。
2.3中华绒螯蟹幼蟹对不同水平醋酸棉酚饲料料的表观消化率
河蟹对不同水平醋酸棉酚饲料的表观消化率的测定结果显示,投喂醋酸棉酚含量不同的饲料后,河蟹对FG0对照组饲料干物质的表观消化率为50.82±0.84%,经统计处理,FG0、FG144和FG288三组间没有显著性差异(p>0.05),FG0、FG288和FG474三组间也没有显著性差异(P>0.05),但FG474组与FG144组相比表观消化率显著性降低(P<0.05);河蟹对FG0对照组饲料中蛋白质的表观消化率为70.67±0.42%,经统计处理,FG144、FG288和FG474三组间有显著性差异,呈显著降低之势(P<0.05)。FG144与FG0组相比,也有下降之势,但没有显著性差异(P>0.05),但FG288、FG474组与FG0组相比蛋白质表观消化率显著性降低(P<0.05)。
2.4醋酸棉酚对中华绒螯蟹幼蟹肠道和肝胰腺组织结构的影响
对河蟹肠道和肝胰腺超微结构的研究结果表明,用添加了醋酸棉酚的饲料投喂10周后,河蟹肝胰腺细胞内的细胞器受到损伤:线粒体内嵴减少或消失呈膨大状;溶酶体增加;内质网膨大,多为光面内质网;内膜结构紊乱;核膜溶解并内陷,核物质外溢。肠道的粘膜皱襞增多且不饱满,微绒毛稀疏。对河蟹肝胰腺显微结构的研究结果表明处理组幼蟹肝胰腺的部分细胞解体,基膜不完整,管腔内出现细胞碎片;液泡体积很大并明显增多。