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背景:在对肿瘤发生发展基础机制的大量探究基础上,肿瘤的早诊、早治及精准化治疗发展迅速。我们对肿瘤这种疾病的了解更加深入,也显著提高了癌肿患者的生存率和生存质量。然而肿瘤对化疗、放疗和靶向治疗的耐药逐渐增加,肿瘤治疗的进展趋向缓慢。寻找新的治疗靶点和增加肿瘤对辅助治疗的敏感性依然是亟需解决的重要问题。在课题的前期研究中,我们发现PORCN蛋白的特异性抑制剂LGK974可以增加肿瘤细胞的放射敏感性,随后猜想PORCN同样影响肿瘤细胞的化疗敏感性,且这种对放化疗敏感性的影响机制基于对DNA损伤修复功能的参与。拟通过实验探讨PORCN在肿瘤细胞DNA损伤修复中的作用,并更进一步探讨其对临床治疗的意义。方法:本研究在前期研究基础上,通过细胞学实验探讨PORCN对肿瘤细胞化疗敏感性的影响,并初步探究PORCN在肿瘤细胞DNA损伤修复中的作用。进一步并通过生物信息学方法分析PORCN表达与肿瘤患者生存的相关性。首先我们用特异性抑制剂LGK974抑制PORCN,在顺铂模拟化疗的环境中通过MTS实验检测PORCN对化疗敏感性的影响。然后用sh RNA敲低PORCN,建立PORCNdeficient稳定转染细胞系。随后用电离辐射对肿瘤细胞进行DNA损伤诱导,通过免疫荧光实验、彗星实验和Western blot实验检测PORCN-deficient细胞的DNA损伤修复能力。最后通过GEPIA分析TCGA数据库数据,探究PORCN表达与DNA-PKcs的m RNA表达的相关性,以及与不同癌肿患者生存的相关性。结果:(1)抑制PORCN增加肿瘤细胞对铂类药物的化疗敏感性;(2)免疫荧光实验电离辐射后γ-H2AX的焦点延续时间增长,彗星实验尾矩增加,PORCNdeficient细胞出现DNA损伤修复功能缺陷。(3)TCGA数据分析显示20种肿瘤中PORCN和DNA-PKcs的m RNA表达正相关,低表达PORCN的Luminal A型乳腺癌患者总生存期更长,具有统计学意义。结论:特异性抑制PORCN可以增加肿瘤细胞的放化疗敏感性。PORCN在肿瘤细胞的DNA损伤修复过程中起重要作用,抑制或敲低PORCN的肿瘤细胞出现DNA损伤修复的过程延迟和功能障碍。PORCN在多种肿瘤组织中的表达与DNA损伤修复中的关键蛋白DNA-PKcs的表达具有正相关性。低表达PORCN的Luminal A型浸润性乳腺癌患者总生存(overall survival,OS)高于高表达PORCN的患者。本研究显示了PORCN对肿瘤细胞放化疗效果的影响、在DNA损伤修复过程中的重要作用以及与特定类型乳腺癌患者总生存期的相关性。基于这些发现,我们可以更进一步探究将PORCN作为肿瘤治疗新的分子靶点和可以预测肿瘤患者生存的潜在标志物。