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目的观察大网膜乳斑与胃癌腹膜种植性转移的关系,及大网膜乳斑数量和巨噬细胞在胃癌细胞种植后所发生的动态变化,以探讨大网膜乳斑对胃癌细胞种植转移所发挥的作用和作用的机制;对比研究大网膜乳斑和巨噬细胞在有无外界作用后的形态和数量的差异。方法采用细胞培养,将人胃低分化腺癌BGC-823细胞株传代培养至对数生长期,计数板计数调整细胞浓度为1×10~7个/ml,收集细胞备用。选用裸鼠构建胃癌动物模型,裸鼠共80只,随机分成实验组(56只)和对照组(24只),实验组裸鼠均在同一时间点按0.2ml/只、腹部小切口注射的方式注入胃癌细胞悬液,对照组给予生理盐水作为阴性对照,分别于不同时间点即注射后第1天、第3天、第7天、第14天取材,实验组每次14只,对照组每次6只,一半腹腔注射墨汁0.5ml2h后取大网膜铺片计数大网膜乳斑数量和电子显微镜观察乳斑巨噬细胞的超微结构变化,另一半直接取大网膜制成石蜡标本,HE和免疫组织化学法观察大网膜巨噬细胞形态和数量的变化。结果1.种植后第1天大网膜乳斑数量、巨噬细胞表达率实验组与对照组的比较:第1天大网膜乳斑数量实验组与对照组比较无统计学差异(P>0.05),第1天大网膜巨噬细胞表达率实验组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。2.种植后第3天大网膜乳斑数量、巨噬细胞表达率实验组与对照组的比较:第3天大网膜乳斑数量实验组与对照组比较无统计学差异(P>0.05),第3天大网膜巨噬细胞表达率实验组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。3.种植后第7天大网膜乳斑数量、巨噬细胞表达率实验组与对照组的比较:第7天大网膜乳斑数量实验组与对照比较有显著统计学差异(P<0.001),第7天大网膜巨噬细胞表达率实验组与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。4.种植后第14天大网膜乳斑数量、巨噬细胞表达率实验组与对照的比较:第14天大网膜乳斑数量实验组与对照比较有显著统计学差异(P<0.001),第14天大网膜巨噬细胞表达率实验组与对照组比较有显著统计学差异(P<0.01)。5.大网膜乳斑数量、巨噬细胞表达率随种植时间的延长数量增加、功能改变:实验组大网膜乳斑数量第1天、第3天相比无统计学差异(P>0.05),第1天与第7天相比有显著统计学差异(P<0.001),第1天与第14天相比有显著统计学差异(P<0.001),第3天与第7天相比有显著统计学差异(P<0.001),第3天与第14天相比有显著统计学差异(P<0.001),第7天与第14天相比有显著统计学差异(P<0.001);实验组乳斑数量与种植时间有相关关系,且为正相关关系(r=0.900,P<0.001);对照组大网膜乳斑量第1天、第3天、第7天、第14天相比均无统计学差异(P>0.05),对照组乳斑数量与种植时间无相关关系(r=0.165,P>0.05)。实验组巨噬细胞表达率第1天、第3天相比无统计学差异(P>0.05),第1天与第7天相比有显著统计学差异(P<0.001),第1天与第14天相比有显著统计学差异(P<0.001),第3天与第7天相比有显著统计学差异(P<0.001),第3天与第14天相比有显著统计学差异(P<0.001),第7天与第14天相比有显著统计学差异(P<0.001);实验组大网膜巨噬细胞表达率与种植时间有相关关系,且为正相关关系(r=0.620,P<0.001);对照组巨噬细胞表达率第1天、第3天、第7天、第14天相比均无统计学差异(P>0.05),对照组大网膜巨噬细胞表达率与种植时间无相关关系(r=0.200,P>0.05)。6.乳斑巨噬细胞超微结构变化:透射电子显微镜观察得出实验组胃癌细胞种植后第1天、第3天、第7天和第14天乳斑上均有大量的巨噬细胞,随着种植时间的延长,乳斑巨噬细胞数量增多,巨噬细胞呈肾形、圆形、卵圆形、不规则形、体积较大,胞浆内线粒体、高尔基复合体、内质网丰富,胞浆内吞噬有墨汁颗粒,胞核浓密,染色质聚集,胞膜表面有许多突起,突起很长很密,相邻细胞间的突起紧密相连,与癌细胞毗邻,细胞间缝隙紧密。对照组第1天、第3天、第7天和第14天乳斑巨噬细胞体积较实验组小,胞浆成分不丰富,胞膜表面突起少且小,细胞总体上呈静止态。7.不同时间点癌细胞种植的情况:种植后第1天肉眼观察腹腔内未见癌结节,HE染色大网膜上有个别癌细胞,周围巨噬细胞、淋巴细胞浸润;第3天肉眼观察大网膜有癌结节形成,HE染色大网膜癌细胞成团分布,周围巨噬细胞浸润明显;第7天肉眼观察腹腔内满布癌结节,大网膜癌结节融合成团成块,灰白色、质韧、切面漩涡状,肠系膜癌结节散在分布,肝、脾、肠系膜、隔膜、前腹壁、切口处均见癌结节,HE染色镜下清晰可见大网膜癌细胞团,巨噬细胞存在于癌细胞之间,癌细胞间血管丰富,部分坏死;第14天肉眼观察腹腔内满布癌结节,胃肠粘连,大网膜已被癌结节占据,癌结节灰白色、质硬、切面漩涡状,肠系膜癌结节密布或融合成团,肝、脾、肠系膜、隔膜、壁腹膜均见癌结节,切口处癌结节已凸出于皮肤表面。结论1.胃癌细胞在腹腔内的种植是有选择性的,其中大网膜是胃癌细胞最易种植和最适宜生长的部位;2.胃癌细胞随种植时间的延长发生了全腹腔的种植;3.大网膜乳斑随种植时间延长数量增多更大限度地承接癌细胞数量的激增;4.乳斑巨噬细胞随种植时间延长数量增多促进了癌细胞的生长;5.癌细胞种植后乳斑巨噬细胞发生了一定的形态学改变。