微生物法生产烟酰胺发酵工艺的研究

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烟酰胺,维生素B3,主要存在于动物体内,是辅酶I和辅酶Ⅱ的主要成分,能够治疗糙皮病;分为食品、医药、饲料三种商品规格,主要作为饲料中的营养性添加剂,提高动物的抗病,防病能力。随着人类的膳食结构从植物型向动物型的转变,烟酰胺作为饲料添加剂具有广阔的市场前景。微生物法生产烟酰胺具有反应条件温和,转化率高,产品质量高以及污染小的特点。以酶活为指标,研究了烟酰胺生产工艺过程中高产腈水合酶诺卡氏菌菌株的筛选,发酵条件及发酵培养基的优化。结果表明:(1)分别研究了紫外线,微波,硫酸二乙酯对诺卡氏菌Norcardia sp.HD9611的诱变效应,确定最佳诱变条件:紫外线,功率15W、照射距离35cm、照射时间90s;微波,照射强度60%、照射时间80s;硫酸二乙酯,浓度0.8%、40min。并在单因素诱变的基础上,设计多组复合诱变,筛选到一株高产腈水合酶菌株HD1220,其酶活为1066.4U/mL,比原始菌株提高25%。最后观察了该突变株的细胞形态,呈分枝状或串珠状的细密如丝排列,以及测定生长曲线。(2)采用单因素和正交试验的方法,研究了突变株HD1220的发酵产酶条件,确定最佳发酵条件为:种龄35h,接种量6%,装液量30mL,初始pH8.0,发酵温度26℃,摇床转速220rpm。(3)采用单因素和响应面法,研究了突变株HD1220发酵培养基中的碳源,氮源,金属离子,诱导剂四个因素,确定最佳发酵培养基成分组合为:葡萄糖18.43g/L,酵母膏9.33g/L,钴离子12.81mg/L,脲7g/L。
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