日本雪椿冬芽萌发及组培快繁技术研究

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日本雪椿(Camellia japonica var.decumbe)属于山茶花的一个变种,耐寒性强,是我国引进的重要花卉观赏树种。为了快速繁育日本雪椿,加强日本雪椿苗木管理,提高其抗寒性,本文在日本雪椿冬芽萌发特性以及低温胁迫对冬芽和叶片生理生化物质的影响的基础上进行了日本雪椿组培快繁技术研究,得出如下结果。(1)在三个不同时间段中,20℃是最适合雪椿顶芽的膨大,20℃的雪椿顶芽最先萌发,萌发率最高。同时20℃是最适合雪椿侧芽的膨大,20℃雪椿侧芽最先萌发,萌发率最高。(2)在三个不同的冷冻处理的情况下,0℃经过15d冷冻处理最先萌发,20℃雪椿侧芽的萌发率最大。经过0℃冷冻处理15d的雪椿存活率为100%,经过-5℃冷冻处理15d的雪椿苗子为66.7%,经过-10℃冷冻处理15d的雪椿苗的存活率为33.3%。(3)不同低温胁迫生理生化指标的变化趋势:分别经过0℃、-5℃、-10℃冷冻处理的雪椿叶片、芽SOD活性的变化是呈现先上升后下降的趋势;经过0℃、-5℃、-10℃冷冻处理的雪椿叶片、芽可溶性蛋白的含量变化呈现先缓慢下降后上升再缓慢下降的趋势,变化比较小;经过0℃、-5℃、-10℃低温胁迫雪椿叶片、芽POD的变化趋势是先快速下降后又缓慢上升的趋势,变化的趋势比较大。(4)雪椿芽、叶片最佳的消毒方案是:经流水冲洗2-5h后,用75%酒精泡30s,然后用灭菌的蒸馏水冲洗1-2遍,然后用0.1%1Hgcl2消毒8min,然后用灭菌的蒸馏水冲洗5-7遍。存活率为99.5%。(5)最适合雪椿芽诱导、增殖的培养基是MS培养基,适合芽诱导的最佳激素组合是MS+1.5mg·L-1+0.1mg·L-1,诱导率为85%,平均芽长为1.6cm,适合芽苗增殖的最佳激素组合为MS+NAA0.2 mg·L-1+IBA0.5 mg·L-1+3 mg·L-1,增殖倍数是2.63,有效芽率为86.7%。(6)雪椿叶片愈伤诱导的最佳激素组合是:MS+6-BA2mg·L-1+IBA0.5 mg·L-1,诱导率为93%,雪椿叶片愈伤增殖的最佳激素组合是:MS 6-BA2mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1,雪椿愈伤诱导不定芽的最佳激素组合是:MS+0.5mg·L-1IBA+5 mg·L-16-BA,MS+0.2mg·L-1NAA+3mg·L-16-BA。(7)雪椿生根的最佳激素组合:1/2MS+NAA1.0mg·L-1
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