番茄溃疡病（Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis,简称Cmm）是番茄（Lycopersicon culentum Mill.）生产中最为严重、具有毁灭性的病害之一。该病自从1909年首次在美国密执安州的温室番茄上发现以来,现已广泛分布于美国各番茄产区,并逐渐成为世界性病害。目前番茄溃疡病在我国北京、黑龙江、吉林、内蒙古、新疆、河南、河北、山西、山东、上海、海南等省、市、自治区都有发生,使许多地区番茄生产受到了不同程度的影响。有研究表明,furA基因与katA基因可能与番茄溃疡病原菌（Cmm）致病性相关。为验证Cmm中furA基因与katA基因之间的相互关系,推测其致病机理,为抗病育种提供理论依据,我们构建了番茄溃疡病furA和katA基因的不同缺失突变体,通过电击转化的方法将其转入Cmm野生型菌株中,并分别进行了分子生物学检测和生理指标的检测。以Cmm野生菌株的基因组DNA为模板,根据furA和katA基因序列的设计特异引物,进行PCR扩增反应。PCR扩增产物电泳分析后,回收目的条带,与pMD18-T载体连接,分别命名为Cmm 1号,2号,3号,4号片段和123-T。利用BamHⅠ位点,将经过序列测定正确的目的片段从pMD18-T载体上酶切回收。用T₄ DNA连接酶分别连接1号和2号片段,3号和4号片段。之后通过PCR扩增对不同缺失片段加KpnⅠ接头,回收目的条带,连pMD18-T或pEASY-T1载体;利用KpnⅠ位点,将测序正确的目的片段从测序载体上酶切回收,用T4 DNA连接酶连接分别获得1234,12’3,12’34;上述片段PCR扩增加EcoRⅠ接头,连pMD18-T或pEASY-T1载体经EcoRⅠ酶切;同时将pHN216表达载体线性化,回收的条带。将回收的EcoRⅠ酶切1234,12’3,12’34,123加EcoRⅠ接头片段和pHN216载体片段用T4 DNA连接酶连接,连接产物转化到大肠杆菌感受态细胞（DH5α）中,挑取阳性克隆进行鉴定。随后通过电击转化的方法将上述鉴定正确的转化子转入Cmm野生型菌株中。结果发现,在培养基中Fe²⁺浓度分别为0和0.5mM的情况下,Cmm野生菌株和各突变菌株,以及空载体对照的过氧化氢消耗量,显示出不同的差异。当培养基中Fe²⁺浓度为0 mM时,各处理间差异不显著;当培养基中加入0.5mM Fe²⁺时,各处理间差异显著:12’3-2（furA-katA-）和12’34-2（furA-katA+）是野生型（furA+katA+）的1.5倍;123-2（furA+katA-）是野生型（furA+katA+）的0.5倍;空载体对照与野生型相比,差异不显著。