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本文以鼠曲草为原料,较为系统地研究了鼠曲草类黄酮的制备与体外抗氧化及抑菌活性。采用超声波辅助法提取鼠曲草类黄酮,探究其主要因素对提取效果的影响,并采用响应面法优化其提取工艺条件;采用金属络合技术分离纯化鼠曲草类黄酮,并优化其关键工艺参数;通过体外抗氧化和抑菌试验对鼠曲草类黄酮及其锌络合物的体外抗氧化及抑菌活性进行研究,并对其机理进行初步探讨。主要研究结果如下:(1)超声波辅助提取鼠曲草类黄酮工艺研究采用超声波辅助提取鼠曲草类黄酮。着重考察料液比、提取溶剂(乙醇)的浓度、超声波提取温度,提取时间和超声波功率对鼠曲草类黄酮提取率的影响。在单因素基础上,通过4因素5水平的二次回归通用旋转组合设计,建立鼠曲草类黄酮提取率Y与提取温度X1、乙醇浓度X2、超声波功率X3和料液比X4的回归方程式为:Y=14.95+0.63X2+0.14X3+0.47X4+0.15X1X2-0.08X1X3-0.36X2X4-0.07X12-0.36X22-0.08X32-0.25X42结果表明,采用响应面法优化出超声波辅助提取鼠曲草类黄酮工艺参数组合(校正后)为:料液比1:35,乙醇浓度75%,超声波功率350 W,提取温度35℃,以此工艺参数组合为条件,超声波辅助提取50 min,鼠曲草类黄酮的提取率可达15.25%。(2)金属络合法分离纯化鼠曲草类黄酮关键-工艺研究采用金属络合法分离纯化鼠曲草类黄酮。基于确定与鼠曲草类黄酮络合的适宜金属盐,着重探讨金属络合法分离纯化鼠曲草类黄酮工艺,并采用L9(34)正交设计优化其关键工艺参数组合。结果表明:乙酸锌为分离纯化鼠曲草类黄酮的理想络合金属盐,其分离纯化鼠曲草类黄酮的优化参数组合为:乙酸锌溶液浓度9mg/mL,以无水乙醇为溶剂配制鼠曲草类黄酮粗提物样液初始浓度1.5 mg/mL,pH 8.0,以此工艺参数组合为条件,络合反应10 min,鼠曲草类黄酮的络合转化率可达(89.07±0.13)%;在上述的络合反应体系中,加入浓度为1.5%的解离剂乙二胺四乙酸(EDTA),鼠曲草类黄酮锌络合物解离率可达(88.51±0.09)%;在此分离纯化条件下,鼠曲草类黄酮纯度由粗提物的20.21%提高到67.47%,纯度提高了2.4倍。(3)鼠曲草类黄酮体外抗氧化及抑菌活性研究以抗坏血酸(VC)和山梨酸钾为阳性对照,测定、分析了鼠曲草类黄酮及其锌络合物的体外抗氧化能力和抑菌活性。结果表明,鼠曲草类黄酮及其锌络合物均有较强的体外抗氧化和抑菌活性,且在一定的浓度范围内均出现明显的量-效关系。鼠曲草类黄酮及其锌络合物清除二苯代苦味酰自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的半抑制浓度(IC50)分别依次为0.394 mg/mL 0.326 mg/mL、0.369 mg/mL与0.260 mg/mL、0.374 mg/mL、0.167 mg/mL;在试验浓度范围内,对铁氰化钾的还原力,鼠曲草类黄酮锌络合物溶液极显著大于鼠曲草类黄酮与Vc溶液(p<0.0.01),鼠曲草类黄酮溶液显著大于Vc溶液(p<0.05)。鼠曲草类黄酮及其锌络合物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有明显抑制效果,且后者的抑菌效果更强,随着样液与菌悬液作用时间增长至8-10 h,其抑菌率均增至最大值,此外二者对所试菌株中的革兰氏阳性菌(G+菌)的抑制活性均强于革兰氏阴性菌(G-菌),鼠曲草类黄酮及其锌络合物对上述4菌种最低抑菌浓度(MIC)分别为:0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.20 mg/mL、 0.10 mg/mL与0.20 mg/mL、0.20 mg/mL、0.20 mg/mL、0.10 mg/mL。