肾蒂阻断方式及谷胱甘肽对肾缺血再灌注损伤保护的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:temp_dl
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目的:进行肾脏血流阻断的手术时,例如保留肾单位肿瘤切除术、肾剖开取石术等,肾脏经历了短暂缺血与再灌注,此过程往往会引起肾脏组织和细胞损伤。因此,本研究通过实验探讨以下两部分问题:1.两种不同肾蒂阻断方式(即单独阻断肾动脉与同时阻断肾动静脉)所引起肾脏缺血再灌注损伤是否有差异。2.肾血流阻断前应用谷胱甘肽对大鼠肾缺血再灌注损伤是否有保护作用。从而为肾脏手术中肾缺血再灌注损伤找寻有效的预防和治疗措施。方法:实验一:探讨两种肾蒂阻断方式(即单独阻断大鼠肾动脉与同时阻断肾动静脉)所引起肾脏损伤是否有差异。健康幼年雄性SD大鼠90只(大连医科大学SPF实验动物中心提供,体重为220-250g)随机分为三组:对照组、阻断肾动脉组(A组)、阻断肾动静脉组(A+V组),以上每组再分为三亚组:24h、48h、72h,每亚组n=10。分别考察24h组、48h组、72h组肾脏组织中SOD、MDA和Na~+-K~+-ATPase生化指标,HE染色组织形态,Bcl-2蛋白和Bax蛋白的变化。实验二:探讨肾血流阻断前应用谷胱甘肽对大鼠肾缺血再灌注损伤是否有保护作用。健康幼年雄性SD大鼠30只(大连医科大学SPF实验动物中心提供,体重为220-250g)随机分为三组:对照组、缺血再灌注组(IRI组)和谷胱甘肽治疗组(GSH组),n=10。考察阻断大鼠肾脏动静脉45分钟并再灌注48小时后对照组、IRI组和GSH组中肾脏组织SOD、MDA和Na~+-K~+-ATPase生化指标,HE染色组织形态,Bcl-2蛋白和Bax蛋白以及Tunel指数的改变。结果:实验一:对照组的24h亚组、48h亚组、72h亚组中肾脏组织中SOD均值分别为:101、101和101(U/mg protein);Na~+-K~+-ATPase均值分别为7.8、7.8和7.7(μmolPi/mgprotein/hour); MDA分别为4.6、4.7和4.6(nmol/mg protein)。A组的24h亚组、48h亚组、72h亚组中肾脏组织中SOD值分别为:75、64和61(U/mg protein);Na~+-K~+-ATPase分别为1.9、4.2和5.1(μmolPi/mg protein/hour); MDA分别为8.4、6.7和6.8(nmol/mg protein)。A+V组的24h亚组、48h亚组、72h亚组中肾脏组织中SOD值分别为:63、61和65(U/mg protein);Na~+-K~+-ATPase分别为2.3、4.3和5.0(μmolPi/mgprotein/hour); MDA分别为8.3、7.7和6.8(nmol/mg protein)。同照组相比较,A组及A+V组的肾脏组织中SOD和Na~+-K~+-ATPase均明显降低并且MDA均明显升高(P值均小于0.05),HE染色观察肾组织与细胞损伤较为明显,Bcl-2和Bax蛋白表达分别显著下调和上调并且肾细胞凋亡更为严重。但A+V组与A组比较,以上指标差别无统计学意义。实验二:对照组、IRI组和GSH组的肾脏组织中SOD分别为101、63和85(U/mgprotein);Na~+-K~+-ATPase分别为7.8、2.3和5.8(μmolPi/mg protein/hour);MDA分别为4.6、8.3和5.3(nmol/mg protein)。与对照组比较,IRI组和GSH组的肾脏组织中SOD和Na~+-K~+-ATPase均明显降低并且MDA均显著升高(P值均小于0.05),HE染色观察肾脏组织和细胞损伤较明显,Bcl-2和Bax蛋白表达分别明显下调和上调并且肾脏细胞凋亡严重。此外,与IRI组比较,GSH组肾脏的损伤情况得到显著的改善,Bcl-2和Bax蛋白表达得到了相对的上调和下调(P<0.05),肾脏细胞凋亡指数Tunel凋亡明显降低(P<0.05)。结论:1、不同的肾蒂阻断方式(即单独阻断动脉与同时阻断动静脉)所引起的肾脏缺血再灌注损伤程度无明显差异。2、肾血流阻断前给予谷胱甘肽能够有效地改善大鼠肾脏缺血再灌注损伤。
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