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本论文中采用定点突变的方法以赖氨酸(K)代替RGD序列中的精氨酸(R),实验中首先设计突变引物采用PCR的方法进行定点突变。将突变Adinbitor基因进行克隆、转化与诱导后,得到了该蛋白的可溶性高效表达。经组氨酸亲和层析纯化,获得了分子量为9KD的均质蛋白。
本论文通过定点突变的方法成功的获得了由KGD序列代替RGD序列的rAdinbitor,并成功的改变了其生物学活性。获得了能显著抑制血小板聚集而无明显的抑制血管新生作用的去整合素。所有这些实验结果提示,KGD-rAdinbitor作为含有KGD序列的去整合素的典型代表,作为一种抗血栓新药的潜在的应用价值。