论文部分内容阅读
目的:探讨miR-125b缓解肝缺血再灌注损伤的相关分子机制,明确miR-125b在体内外模型中缓解肝缺血再灌注损伤的功能。方法:建立小鼠肝缺血再灌注体内、体外模型。使用qRT-PCR检测miR-125b、TNF-α、IL-1β、IL-6和TRAF6的RNA水平;使用免疫荧光评估p-p65、TRAF6在细胞中的定位与表达;使用Western Blot检测p-p65、p65、TRAF6、IL-1β的蛋白表达;使用ELISA检测TNF-α、IL-1β和IL-6的表达;使用HE染色观察肝脏组织的形态学改变;使用肝功能检测试剂盒检测ALT和AST的水平。结果:qRT-PCR结果显示肝缺血再灌注体外模型中miR-125b的表达显著下调(p<0.05),而TNF-α、IL-1β、IL-6和TRAF6的表达显著上调(p<0.05)。使用miR-125b mimics转染细胞上调miR-125b水平后,p-p65及TRAF6免疫荧光染色强度减弱,而miR-125b inhibitors则能逆转这一效果。使用miR-125b inhibitors下调miR-125b后,Western Blot结果显示p-p65、TRAF6及IL-1β的表达显著升高(p<0.01),ELISA提示炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平显著升高(p<0.05),HE染色观察到小鼠肝组织病理改变增加(p<0.05),肝功能检测结果则提示血清ALT和AST水平显著升高(p<0.05)。结论:miR-125b能够通过抑制TRAF6和NF-κB,下调炎性因子的释放并改善小鼠肝脏功能,从而达到缓解小鼠肝缺血再灌注损伤的目的。本文浅析了miR-125b缓解肝缺血再灌注炎症、改善肝脏功能的相关分子机制,验证了miR-125b在体内、体外实验中的抑炎功能,为临床肝缺血再灌注损伤的治疗提供了理论基础及潜在的治疗靶点。