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目的:研究淫羊藿次苷Ⅱ(ICS Ⅱ)对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)诱导的PC12细胞损伤的作用及其作用机制。方法:通过OGD 2 h/R 24 h诱导PC12细胞氧化应激损伤在体外模拟体内脑缺血再灌注损伤,N-乙酰半胱氨酸(NAC)作为阳性对照药。将PC12细胞按药效学分组随机分为7组:空白组,空白+ICS Ⅱ 50μM组,OGD/R组,OGD/R+ICS Ⅱ 12.5μM组,OGD/R+ICS Ⅱ 25μM组,OGD/R+ICS Ⅱ 50μM组,OGD/R+NAC100μM组。采用MTT法检测细胞活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率及细胞活性氧(ROS)含量,Mito-SOX Red荧光染色检测PC12细胞线粒体内ROS,罗丹明123检测PC12细胞线粒体膜电位(MMP),一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测PC12细胞凋亡情况。通过Western blot法检测Nrf2、Keap1、HO-1、NQO-1、SIRT3、IDH2、Bax、Bcl-2蛋白表达及active-Caspase-3水平的变化。结果:OGD/R组较空白组细胞活力明显降低(P<0.01),LDH漏出率显著增加(P<0.01),细胞内和线粒体内ROS水平升高,MMP降低且胞浆内Nrf2、Keap1、Bax蛋白表达以及active-Caspase-3水平显著增加(P<0.01),胞核内Nrf2、HO-1、NQO-1、SIRT3、IDH2以及Bcl-2蛋白的表达明显降低(P<0.01)。而ICS Ⅱ作用24 h后可明显增加PC12细胞活力,显著减少LDH漏出率(P<0.01)、细胞内和线粒体内ROS含量,并恢复MMP。ICS Ⅱ能够下调胞浆内Nrf2、Keap1、Bax蛋白表达以及active-Caspase-3水平,并上调胞核内Nrf2、HO-1、NQO-1、SIRT3、IDH2和Bcl-2的蛋白表达。结论:在本实验条件下,ICS Ⅱ能够减轻OGD/R诱导的PC12细胞氧化损伤,其作用机制可能与调节Nrf2/SIRT3信号通路有关。