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研究表明多种原虫(阿米巴原虫、克氏锥虫、柔嫩艾美尔球虫、恶性疟原虫、刚地弓形虫等)具有抗肿瘤作用。这些原虫的感染或其裂解蛋白能活化抗原递呈细胞(APC),激活淋巴细胞,促进T细胞向Th1方向分化,改善肿瘤微环境,减少癌症局部的抑制性细胞和细胞因子,促进癌细胞凋亡。柔嫩艾美尔球虫抗原对机体无毒性,在抗癌和抗病毒感染中已产生良好的效果。为了研究艾美尔属球虫蛋白的抗肿瘤作用,了解球虫蛋白的免疫调节作用及机制,本实验选取兔致病力最强的斯氏艾美尔球虫(E.stiedai),提取卵囊可溶性蛋白(ESCA),并应用流式细胞术(FCM)、免疫荧光组织化学等试验方法检测ESCA对小鼠结肠癌(CT26)肿瘤细胞的生长、增殖影响及荷瘤小鼠免疫指标的变化情况。主要研究内容如下:(1)ESCA抗小鼠结肠癌有效浓度筛选108个E.stiedai卵囊经研磨、超声破碎、离心后获得ESCA,建立CT26皮下肿瘤模型,应用不同剂量ESCA腹腔注射荷瘤小鼠,观察肿瘤生长曲线、相对肿瘤增值率、小鼠生存率和外周血淋巴细胞增殖能力,筛选出ESCA抗结肠癌(CT26)的最佳有效浓度为50μg/d。(2)ESCA抗小鼠结肠癌免疫作用机制研究皮下接种结肠癌细胞后ESCA(50μg/d)连续注射5d,25d后检测免疫指标变化。结果显示ESCA能够显著抑制小鼠结肠癌CT26皮下肿瘤的生长;脾脏树突状细胞表面主要组织相容性复合体MHCⅠ、MHCⅡ和共刺激分子CD80、CD86的表达显著升高,并提高了其分泌IL-12的水平,活化了树突状细胞;ESCA增强NK细胞杀伤作用,小鼠脾脏中NK细胞数量增加,其表面的杀伤相关分子CD107表达升高,脾和腋下淋巴结NK细胞分泌的IFN-γ水平明显升高,提示NK细胞的功能增强;ESCA组小鼠脾脏、腋下淋巴结和肠系膜淋巴结中CD8+T细胞分泌的IFN-γ水平升高,脾脏和腋下淋巴结中CD8+T细胞表面CD107表达增加,说明ESCA能够激活CD8+T细胞,诱导CTL作用;小鼠外周血淋巴细胞CD4+/CD8+比值升高,提示小鼠免疫处于免疫增强状态;在对肿瘤血管生成研究中表明,ESCA组肿瘤组织中血管内皮细胞表面标志CD31明显降低;ESCA体内致敏的淋巴细胞能够显著抑制CT26肿瘤细胞增殖;建立CT26肿瘤细胞肺转移模型,研究ESCA对肿瘤转移的影响,结果显示小鼠肺脏肿瘤转移结节数量显著降低,小鼠生存率明显提高。ESCA能够增强小鼠抗肿瘤免疫反应,抑制肿瘤生长和转移,其免疫作用机制将为研究多种原虫的抗肿瘤作用提供理论依据。