饲用裂殖壶菌制剂的研制

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海洋真菌裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)是一种产油微生物,其油脂中富含多不饱和脂肪酸,能够补充提高饲养物体内所缺乏的脂肪酸成分,增强其机体免疫力,促进生物更好地生长。并且该菌株生产繁殖速度快,适用于工业化发酵生产。本文选用菌株Schizochytrium sp.DP-16,对其培养基进行优化,并进行饲用制剂的研制。研制饲用菌粉,生物量是其重要的评价指标。通过单因素优化和正交试验,对Schizochytrium sp.DP-16培养基进行优化,来提高该菌的生物量。首先通过碳源、氮源和外源添加剂的单因素试验,选取了甘油作为碳源,酵母浸粉作为氮源,柠檬酸和谷氨酸钠作为外源添加剂,设计L9(34)的正交试验。通过正交试验结果,确定了四种物质的最优配比:甘油80 g·L-1,酵母浸粉10 g·L-1,谷氨酸钠15 g·L-1,柠檬酸0.6 g·L-1。以最优培养基培养菌体得到生物量为54.0 g·L-1,比基础培养基培养得到的生物量提高了35%。采用真空冷冻干燥技术,分别对离心得到的裂殖壶菌菌体和加入甘油为保护剂的菌体进行冻干处理,制备饲用菌粉。结果表明,未加入保护剂菌粉和加入保护剂后冻干得到的菌粉二者形态相同,均为粉末状固体,整体呈棕黄色,带有少许的海腥味,但是加入保护剂的菌粉产出率较低。同时通过气相质谱分析(GC-MS)对冻干前菌体和两种菌粉的油脂脂肪酸组成成分进行分析对比,三者基本成分相同,其各成分的百分比含量也大概一致,其中饱和脂肪酸以C14:0、C15:0、C16:0和C17:0为主,不饱和脂肪酸主要是DPA和DHA。因此确定了真空冷冻干燥不会影响裂殖壶菌发酵生产出的油脂脂肪酸成分,同时菌体通过冷冻干燥,得到的粉末状固体,形态较好,可以作为菌粉添加剂投放到饲料中。
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