大麦DUS测试和SSR分子标记鉴定法的比较研究

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大麦为禾本科作物,是世界范围内仅次于水稻、小麦、玉米作物的第四大作物。鉴于大麦的重要性及大麦品系不需要审定就可以进入市场流通,导致大麦种子市场中品种数量的日益增多,遗传背景的相似导致品种在形态外观特征上很相似,导致品种在推广中容易出现违规违法的现象,严重地阻碍了种子产业健康地发展。本研究以来自国内外的44份大麦品种为材料,根据品种的产地,将参试大麦品种分为三类不同来源组,即江浙沪大麦品种组、国内大麦品种组和国际大麦品种组。根据农业行业标准“NY/T2224-2012”,《植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南-大麦》中规定的38个测试性状对3类不同来源组大麦品种进行DUS测试;随机选取均匀分布于大麦7条染色体上28对SSR引物研究3类不同来源组大麦品种的遗传多样性及特异性。比较分析基于大麦DUS测试标准的形态鉴定法与分子标记鉴定法的一致性,结论如下:1.基于大麦DUS测试形态标记法对44份大麦材料进行特异性、一致性和稳定性检验,剔除最低位叶叶鞘的茸毛、旗叶叶耳花青甙的颜色、芒尖端花青甙的颜色、籽粒腹沟的茸毛、开花的类型、芒长、籽粒浆片的着生方式、旗叶叶片的长度、旗叶叶片的角度及穗轴第一节的长度等10个性状,选定特异性、稳定性和一致性均较好的21个定性多态性状和7个量测数量性状用于品种鉴别分析。2.28个选定性状在44个品种中共检验83个变异类型,每个性状平均可以检测到2.964个变异类型,变异幅度在1.047~4.246之间。说明28个性状在44份大麦品种间变异较丰富。聚类分析表明,28个性状可将3类不同来源组内大麦品种鉴别开。3.28个SSR标记在44份参试材料中共检测到102个多态性等位位点,每个标记的等位位点变幅在2~6个之间,平均3.64个,各标记位点的PIC值变幅在0.08~0.77之间,平均为0.45,说明选用标记的多态性较好。4.通过MATLAB软件编程发现鉴别江浙沪组内大麦品种最少需要7个SSR标记,鉴别国内组内大麦品种最少需要6个SSR标记;鉴别国际组内大麦品种最少需要6个SSR标记;鉴别国内外44份大麦品种最少需要14个标记。5.大麦品种的DUS形态鉴定与SSR分子标记鉴定的相关性不显著。相比DUS测试,SSR分子标记鉴定具有快速、方便、不受气候条件影响等优点,具有较好的推广前景,但技术要求高、成本较高。就目前而言,DUS形态鉴定仍是大麦品种真实性和纯度鉴定的主要手段,但必须严格控制田间试验条件、熟练掌握各性状的鉴定时期及标准。
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