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胃癌是危害我国公共健康最严重的恶性肿瘤之一,全球每年胃癌新发病例中,42%的新发病例数来自我国,数量近40万人；根据2008年第三次死因调查的数据,胃癌发病率高居第二,死亡率位居第三位。由于缺乏准确可靠的早期诊断标志物,绝大多数胃癌患者在发现时已处于中晚期,失去了治疗的最佳时期,五年生存率仅20%左右。因此,筛选准确可靠的胃癌生物标志物对提高胃癌早期诊断率和提高患者5年生存率具有重要意义。本研究以胃腺癌细胞系SGC7901和永生化人胃正常上皮细胞系GES为研究模型,利用亚细胞组分分离技术,分离出细胞的胞浆组分,运用双向电泳结合MALDI-TOF/TOF-MS质谱鉴定的方法,分析鉴定出两种细胞系胞浆组分的差异蛋白,共得到12个重复性好、变化倍数在两倍以上的差异蛋白点,鉴定得到10个差异蛋白,包括UCHL1, GSTM3, S100-A11, SERPINB1, PSME1, HSPB1, LTA4H, FABP4, S100-A4, S100-A6等。进而我们通过在另外三种胃腺癌细胞系AGS、BGC823和MKN45中验证了差异蛋白泛素碳末端水解酶-L1(Ubiquitin carboxyl terminal hydro lase L1)在蛋白质水平和mRNA水平上,均显著低于永生化胃正常上皮细胞系GES；通过临床组织样本验证也表明其在胃癌组织中的表达水平也显著低于癌旁正常胃组织中的表达水平。为研究UCHL1在胃腺癌细胞中的功能,我们构建了UCHL1/pcDNA3.1的真核表达载体,将其转染至SGC7901细胞中,并优化了转染条件,得到较好的表达效果。本研究为利用亚细胞蛋白质组学方法开发胃腺癌生物标志物提供了方法上的参考,初步验证了UCHL1蛋白作为胃腺癌潜在生物标志物的可靠性,并为进一步研究UCHL1在胃腺癌中的作用做了初步探索。