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目的:通过应用自噬抑制剂氯喹抑制自噬等方式,观察人肝癌细胞株HepG2/ADM对阿霉素(Adriamycin,ADM)耐药性的变化,探讨自噬在人肝癌细胞株HepG2/ADM对ADM耐药中的作用,进而了解自噬在肝细胞癌耐药中的作用。方法:体外培养人肝癌HepG2细胞株及其耐药株人肝癌HepG2/ADM细胞株;CCK-8比色法检测HepG2/ADM细胞株对ADM的耐药性;MDC法观察不同浓度ADM作用于HepG2/ADM细胞株后胞浆内自噬小泡的分布情况,WB法检测不同浓度ADM作用于HepG2/ADM细胞株后LC3、P62的蛋白表达情况;CCK-8比色法检测自噬抑制剂氯喹二磷酸盐(Chloroquinediphosphatesalt,CQ)对人肝癌耐药细胞株HepG2/ADM的抑制作用;MDC法观察ADM组、CQ组、CQ+ADM组作用于HepG2/ADM细胞株后胞浆内自噬小泡的分布情况,WesternBlot法检测ADM组、CQ组、CQ+ADM组作用于HepG2/ADM细胞株后LC3、P62的蛋白表达情况;CCK-8法检测抑制自噬前后耐药细胞株HepG2/ADM对ADM药敏性的变化,观察耐药的逆转效果;结果:1.ADM对HepG2的IC50为0.77±0.11mg/L,对HepG2/ADM细胞的IC50为5.01±1.43mg/L,HepG2/ADM对ADM的耐药指数为6.51;2.MDC法观察到ADM作用于HepG2/ADM细胞株后胞浆出现自噬泡的堆积,LC3-II表达比率随ADM浓度升高而升高,P62表达比率随ADM浓度升高而降低。3.选择可有效抑制自噬流,浓度为10-50umol/ml的CQ溶液作用于HepG2/ADM细胞株,它的生长抑制率全部小于10%,没有明显毒性作用。4.MDC法观察到ADM组、CQ组、ADM+CQ组细胞胞浆内均出现自噬泡的堆积,以ADM+CQ组最为明显,阴性对照组未见明显自噬泡堆积现象。WesternBlot法可检测到:相较于阴性对照组,ADM组LC3-II表达比率升高,P62表达降低,CQ组LC3-II表达比率升高,P62表达无明显变化,CQ+ADM组LC3-II表达比率明显升高,P62表达较CQ单独作用者稍低,较ADM单独作用组稍高。5.用CQ抑制自噬后,ADM对HepG2/ADM细胞株的IC50由ADM单独作用的5.01±1.43mg/L降至2.83±0.14mg/L,逆转倍数为1.77倍。结论:1.ADM作用于HepG2/ADM时,诱发了人肝癌耐药细胞株HepG2/ADM的自噬。自噬水平随ADM浓度的增大而增高。2.抑制自噬部分逆转了HepG2/ADM对ADM的耐药性。