日粮酪氨酸添加水平对淅川乌骨鸡胸肌肉质的影响及相关差异基因筛选

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淅川乌骨鸡是我国著名的地方特色品种,是国内外报道过唯一一种产绿壳蛋的白羽乌骨鸡。经研究发现乌骨鸡由黑色素沉积量与脂肪酸含量能影响肉品质,其中黑色素含量是最重要的影响因素,通过提高黑色素含量能显著增加乌骨鸡营养水平及风味。为深度挖掘淅川乌骨鸡潜在的黑色素价值,通过外源添加剂调控胸肌黑色素沉积量从而提高其营养水平。因此,本试验通过六组不同的日粮酪氨酸添加水平饲喂0~12周龄淅川乌骨鸡,具体分组及添加水平为对照组(0%)、处理组Ⅰ~Ⅴ(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%)。待12周龄时进行屠宰,测定各组的生长、屠宰性状与肉品质相关指标,再利用转录组测序技术筛选出样本间差异基因,并对差异基因进行GO功能、KEGG通路富集分析。通过生产上表观数据与分子标记相结合,旨在鉴定与黑色素、脂肪酸相关的差异基因,为后续生产高品质淅川乌骨鸡奠定坚实的基础。结果如下:试验一:日粮酪氨酸水平对淅川乌骨鸡生长性能、屠宰性状的影响1、生长性能:体斜长,处理组Ⅴ显著低于处理组Ⅰ、Ⅳ(P<0.05);龙骨长,处理组Ⅴ显著低于其余五组(P<0.05);胫长,处理组Ⅰ显著高于处理组Ⅲ、Ⅴ(P<0.05);胸宽与胸角,处理组Ⅴ显著低于对照组与处理组Ⅰ(P<0.05)。2、屠宰性状:活体重,对照组与处理组Ⅰ显著最高(P<0.05);屠宰率,处理组Ⅳ、Ⅴ显著低于其余四组(P<0.05);腿肌重,处理组Ⅲ、Ⅳ显著低于对照组(P<0.05);而胸肌率与全净膛率在组间无显著差异(P>0.05)。试验二:日粮酪氨酸水平对淅川乌骨鸡胸肌肉品质的影响1、肉品质:腿肌剪切力,处理组Ⅱ显著高于其余四个处理组(p<0.05);胸肌剪切力,处理组Ⅱ、Ⅴ显著高于对照组(p<0.05);但胸肌(45min/24h)与腿肌(45min/24h)的p H值各组之间差异都不显著的(p>0.05)。2、黑色素含量:不同日粮酪氨酸添加水平能显著提高胸肌黑色素沉积量,处理组Ⅱ~Ⅴ胸肌黑色素含量显著高于对照组与处理组Ⅰ(p<0.05),并在酪氨酸添加浓度为0.8%(处理组Ⅳ)时,胸肌黑色素含量最大。3、脂肪酸含量:基于前期黑色素测定试验结果,测定对照组与处理组Ⅳ脂肪酸含量,分别检测出了19种脂肪酸,在饱和脂肪酸中处理组Ⅳ的山嵛酸的含量显著低于对照组(P<0.05),在不饱和脂肪酸中处理组Ⅳ的亚油酸的含量显著低于对照组(P<0.05),其余17种脂肪酸在两组中均没有显著差异(P>0.05)。试验三:日粮酪氨酸水平调控淅川乌骨鸡胸肌肉品质相关基因的鉴定基于前期黑色素测定结果,选择对照组与处理组Ⅳ胸肌组织进行转录组测序。测序结果发现,14935个基因在两样本中表达,其中在两样本中13477个基因共表达,在对照组胸肌中698个基因特异表达,处理组Ⅳ胸肌中760个基因特异表达。最终得到了差异表达基因417个,其中160个基因在处理组Ⅳ上调,257个基因在对照组上调。对差异基因进行GO功能与KEGG富集分析,差异基因共注释到50个GO term和91条KEGG pathway中,并筛选出12条与脂肪酸代谢相关通路,4条黑色素合成相关通路,同时从中发现FAS、ACACB、MITF、TYRP2这四个与脂肪沉积、黑色素合成的有关基因,拟作为后续研究的重点。通过不同日粮酪氨酸水平对12周龄淅川乌骨鸡肉质的影响发现,在适宜的酪氨酸浓度下(0.8%),能显著提高胸肌黑色素的沉积量,并对部分脂肪酸也有显著的影响,随后通过转录测序,筛选鉴定了黑色素与脂肪酸相关的基因与通路。
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