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本文主要从以下几方面进行了论述: 第一部分 目的:通过研究中药白术(atractylodes macrocephala)对晚孕正常子宫平滑肌及经白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)处理的子宫平滑肌收缩的影响,以探讨白术对早产时宫缩的抑制作用。 方法:1.将人足月妊娠子宫平滑肌条浸没于恒温Tyrode灌流液中,通过张力换能器记录肌条的机械活动,直至稳定;灌流液中加入0.5nmol·l-1的缩宫素,观察肌条活动的变化并记录。 2.分别在灌流液中加入中药白术提取物和黄体酮后,观察不同浓度的白术和黄体酮对子宫平滑肌收缩的影响; 3.加入IL-6,观察不同浓度IL-6对子宫平滑肌收缩的影响;为了解黄体酮对IL-6的调控作用以及白术对IL-6作用过的子宫平滑肌收缩的影响,分组加入黄体酮和白术提取物后再分别观察子宫平滑肌收缩的变化。 结果:1.不同浓度IL-6可引起子宫平滑肌收缩频率分别增快6.5％,12.4%,18.4%,振幅分别增强12.4%,26.4%,47.5%,并且呈剂量依赖关系(P<0.05)。 2.浓度为4mg·ml-1、8mg·ml-1的白术抑制正常子宫平滑肌收缩活动,使其振幅各下降32.5%、35.0%,频率各下降12.3%、13.2%(P<0.01),但无剂量依赖关系(P>0.05)。 3.浓度为64.8nmol·ml-1的黄体酮可抑制正常子宫平滑肌收缩活动,使其振幅各下降18.6%(P<0.05),对频率无影响。 4.黄体酮对加入IL-6导致子宫平滑肌的加强收缩有抑制作用。使其振幅下降21.1%(P<0.05),对收缩频率无影响。 5.白术对加入IL-6导致子宫平滑肌的加强收缩亦有明显抑制作用。4mg·ml-1、8mg·ml-1的白术抑制其收缩活动,使其振幅各下降41.5%,41.5%,收缩频率分别减慢了17.9%,13.9%(P<0.01)。 结论:IL-6对子宫平滑肌收缩的影响受孕激素的调节,白术对晚孕正常子宫平滑肌及对IL-6作用过的子宫平滑肌的收缩活动均有抑制作用,且对IL-6作用过的子宫平滑肌收缩活动的抑制作用强于对正常子宫平滑肌。白术可能对早产时子宫收缩有抑制作用,期望为开发中药治疗提供一定的理论依据。 第二部分 目的:通过研究中药白术对正常晚孕子宫平滑肌细胞及经IL-6作用后的子宫平滑肌细胞膜钙依赖的钾通道电流(BKca)的影响,探讨白术对早产时宫缩的抑制作用及电生理机制。 方法:1.急性分离人晚孕子宫平滑肌细胞,采用Axopatch1-D膜片钳放大器测全细胞模式下的单个平滑肌细胞大电导的钙离子依赖钾通道电流(BKca)。 2.测定灌流液中含不同浓度的白术时,子宫平滑肌细胞BKca的变化。 3.测得灌流液中含IL-6(10ng·ml-1)时全细胞模式下BKca;继而在灌流液中分组加入黄体酮和白术时,测定子宫平滑肌细胞BKca的变化。 结果:1.10ng·ml-1IL-6可抑制BKca的幅值约36.9%±13.7%(n=10,P<0.01)。 2.灌流液中含2mg·ml-1白术时,BKca的幅值增强约36.7%±22.6%(n=10,P<0.01)。 3.浓度为12.96umol·ml-1的黄体酮可增强正常子宫平滑肌BKca的幅值约为16.9%±10.1%(n=10,P<0.01)。 4.黄体酮对加入IL-6导致子宫平滑肌的BKca有增强作用。使其幅值上升22.9%±13.5%(n=10,P<0.01)。 5.对于IL-6作用后的细胞,2mg·ml-1白术增强BKca的幅值约45.2%±13.7%(n=10,P<0.01)。 结论:IL-6对子宫平滑肌细胞BKca的影响受孕激素调控,白术可以兴奋晚孕子宫平滑肌细胞及IL-6作用后的子宫平滑肌细胞的BKca,且对IL-6作用后的子宫平滑肌细胞BKca的兴奋作用强于对正常子宫平滑肌细胞;白术有助于维持妊娠时子宫平滑肌的膜电位和静息状态,为开发中药治疗早产提供一定的理论依据。 第三部分 目的:子宫平滑肌外向性钾电流有两种:电压依赖或延迟整流钾电流(IKv)和钙离子依赖钾电流(BKca)。不同的电压和细胞内液可诱发不同种类的钾电流,前面的实验已经研究了不同的干扰因素对BKca的影响,所以有必要了解中药白术对正常晚孕子宫平滑肌细胞及经IL-6作用后的子宫平滑肌细胞电压依赖的钾通道电流(IKv)的影响,更全面得了解IL-6对子宫平滑肌细胞外向性钾电流的影响以及白术对早产时宫缩的抑制作用及电生理机制。 方法:1.急性分离人晚孕子宫平滑肌细胞,采用Axopatch1-D膜片钳放大器测全细胞模式下的单个平滑肌细胞电压依赖的钾通道电流(IKv)。 2.测定灌流液中含不同浓度的白术时,子宫平滑肌细胞IKv的变化。 3.测得灌流液中含IL-6(10ng·ml-1)时全细胞模式下IKv;继而在灌流液中分组加入黄体酮和白术时,子宫平滑肌细胞IKv的变化。 结果:1.10ng·ml-1 IL-6可抑制IKv的幅值约46.3%±18.7%。 2.灌流液中含2mg·ml-1白术时,IKv的幅值增强约31.7%±14.1%。 3.浓度为12.96umol·ml-1的黄体酮可增强正常子宫平滑肌IKv的幅值约为29.3%±12.8%(n=10,P<0.01)。 4.黄体酮对加入IL-6导致子宫平滑肌的IKv有增强作用。使其幅值上升18.4%±10.7%(n=10,P<0.01)。 5.对于IL-6作用后的细胞,2mg·ml-1白术增强IKv的幅值约36.4%±18.1%。 结论:IL-6对子宫平滑肌细胞IKv的影响受孕激素调控;白术可以增强晚孕子宫平滑肌细胞及IL-6作用后的子宫平滑肌细胞的IKv,且对IL-6作用后的子宫平滑肌细胞IKv的兴奋作用强于对正常子宫平滑肌细胞,证明它有助于维持妊娠时子宫平滑肌的膜电位和静息状态,为开发中药治疗早产提供一定的理论依据。