柴胡疏肝散对PCOS大鼠的促排卵作用的实验研究

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目的:以来曲唑诱导多囊卵巢综合征大鼠模型,以疏肝代表方柴胡疏肝散对其进行干预,通过观察大鼠卵巢组织形态、计算成熟卵泡数及黄体数、检测血清性激素及测定下丘脑GnRH积分光密度,来阐明柴胡疏肝散促进卵泡发育和排卵的干预环节及作用机制,进一步丰富从肝论治多囊卵巢综合征的理论基础,为从肝论治多囊卵巢综合征排卵障碍提供实验依据。方法:6周龄SPF级雌性SD大鼠32只,按体重随机分为空白对照组(n=12)和模型组(n=20),以来曲唑灌胃建立多囊卵巢综合征模型;造模成功大鼠按体重随机分为柴胡疏肝散组和模型对照组(n=8)。中药组大鼠予柴胡疏肝散灌胃,其余两组予灭菌饮用水,每天1次,连续28天。末次给药24h后,称量各组大鼠体重;水合氯醛麻醉后,腹主动脉采血,酶联免疫吸附测定血清LH、FSH、T、E2水平;称量大鼠双侧卵巢湿重,计算大鼠卵巢脏器系数;H-E染色法观察大鼠卵巢组织形态,并计算成熟卵泡数和黄体数;免疫组织化学法检测大鼠下丘脑GnRH的表达水平。结果:1造模21天后,模型组持续处于动情间期;与空白对照组比较,模型组体重增加(P<0.05);H-E染色显示:模型组卵泡呈多囊样变,无成熟卵泡,无卵母细胞及卵丘,颗粒层减少至1~3层,黄体数量少。正常组则可见各级卵泡,颗粒多为8~9层。2药物干预后各项指标比较:(1)体重及卵巢脏器系数比较:药物干预治疗4周后,柴胡疏肝散组大鼠体质量及卵巢相对质量较模型对照组比较均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)成熟卵泡及黄体数比较:H-E结果示:与模型组比较,柴胡疏肝散组大鼠卵巢病理情况得到明显改善,黄体及成熟卵泡数量明显增多(P<0.05)。(3)血清LH、FSH、T、E2水平对比:模型组T、LH显著高于正常组(P<0.05),FSH低于正常组(P<0.05);中药组LH、T水平均降低(P<0.05),FSH水平升高,但仍低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组E2水平相近,差异无统计学意义(P>0.05)。(4)免疫组化结果:与正常组比较,模型组的积分光密度显著增加(P<0.01);与模型组比较,柴胡疏肝散组的积分光密度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1柴胡疏肝散对多囊卵巢综合征大鼠具有促排卵的作用。2柴胡疏肝散的促排卵作用可能是通过下调下丘脑GnRH的表达水平,改善下丘脑-垂体-卵巢轴的内分泌功能实现的。
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