左卡尼汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾纤维化的保护作用

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目的:探讨左卡尼汀(L-carnitine,LC)对单侧输尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)大鼠肾纤维化的保护作用及其机制。方法:选择7周龄的雄性Sprague Dawley大鼠40只,体重约220g-250g,将上述大鼠随机分成假手术组、模型组、治疗组(每组8只),模型组及治疗组按时间段分为7天组和14天组。假手术组(Sham):游离左侧输尿管但不结扎和0.5 mL/d生理盐水腹腔注射;模型组:游离左侧输尿管并结扎和0.5 mL/d生理盐水腹腔注射;治疗组:游离左侧输尿管并结扎和LC 200g/kg/d腹腔注射。实验满7天和14天后将大鼠放入代谢笼中,测量大鼠水摄入量及24小时尿量、体重后立即处死大鼠,采集血样,用全自动生化分析仪测定Scr、BUN。取肾组织切片,应用Masson三色染色法观察肾小管间质纤维化(Tubulointe-rstitialfi-brosis,TIF);应用TUNEL染色观察细胞凋亡情况;应用免疫印迹法检测MnSOD、TGF-β1、CTGF、SDHA 的表达。结果:1.UUO模型组梗阻侧肾脏7天后形态发生改变,颜色变浅,有明显肿胀和肿大,肾盂有大量积液,肾实质变薄,14天后上述改变更加明显。UUO术后大鼠的体重、24小时尿量、肾功能指标与假手术组相比均无统计学差异(P>0.05)。与模型组相比,治疗组大鼠的体重、24小时尿量、肾功能指标均无统计学差异(P>0.05)。2.与假手术组相比,UU07天组Masson染色示TIF百分比明显增多;与UUO 7天组相比,UU014天组TIF百分比明显增多;与UU07天组相比,UUO+LC7天组TIF百分比明显减少;与UU014天组相比,UUO+LC14天组TIF百分比明显减少。均有统计学意义(P<0.05)。3.与假手术组相比,UU07天组TUNEL染色阳性细胞数明显增加;与UU07天相比,UUO14天组TUNEL染色阳性细胞数增加;与UU07天相比,UUO+LC7天组TUNEL染色阳性细胞数减少;与UU014天组相比,UUO+LC14天组阳性细胞数减少。均有统计学意义(P<0.05)。4.UU07天组MnSOD表达较假手术组明显下降;与UU07天组相比,UU014天组MnSOD表达明显下降;与UU07天组相比,UUO+LC7天组MnSOD表达明显升高;与UU014天组相比,UUO+LC14天组MnSOD表达明显升高。均有统计学意义(P<0.05)。5.UU07天组SDHA表达较假手术组明显下降;与UU07天组相比,UU014天组SDHA表达明显下降;与UU07天组相比,UUO+LC7天组SDHA表达明显升高;与UUO14天组相比,UUO+LC14天组SDHA表达明显升高,均有统计学意义(P<0.05)。6.UU07天组TGF-β1表达较假手术组明显升高;与UU07天组相比,UUO14天组MnSOD表达明显升高;与UU07天组相比,UUO+LC7天组MnSOD表达明显下降;与UU014天组相比,UUO+LC14天组MnSOD表达明显下降。均有统计学意义(P<0.05)。7.UU07天组CTGF表达较假手术组明显升高;与UU07天组相比,UUO14天组CTGF表达明显升高;与UU07天组相比,UUO+LC7天组CTGF表达明显下降;与U U014天组相比,UUO+LC14天组CTGF表达明显下降。均有统计学意义(P<0.05)。结论:左卡尼汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾纤维化有保护作用,其机制可能与左卡尼汀抗氧化应激、抗凋亡、抗线粒体氧化损伤有关。
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