【摘 要】
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瓜类细菌性果斑病(Bacterial fruit blotch,BFB)为主要发生在西瓜、甜瓜等葫芦科作物上的细菌病害,严重影响西瓜、甜瓜产业的健康发展。该病害的病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)。实验室前期研究表明西瓜噬酸菌野生型菌株Aac5在光照及黑暗条件下运动性、生物膜形成等关键致病因子表型差异显著,然而对其潜在的分子机制尚不清楚。已有研究表明植物病原细菌红光受体B
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瓜类细菌性果斑病(Bacterial fruit blotch,BFB)为主要发生在西瓜、甜瓜等葫芦科作物上的细菌病害,严重影响西瓜、甜瓜产业的健康发展。该病害的病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)。实验室前期研究表明西瓜噬酸菌野生型菌株Aac5在光照及黑暗条件下运动性、生物膜形成等关键致病因子表型差异显著,然而对其潜在的分子机制尚不清楚。已有研究表明植物病原细菌红光受体BphP能通过影响红光信号进而调控致病过程,那么西瓜噬酸菌中是否存在红光受体BphP?且是否参与调控光照及黑暗条件下的致病差异?生物信息学分析表明西瓜噬酸菌Aac5中存在红光受体蛋白BphP的相关基因bphP和bphO,本研究利用基因敲除技术、表型测定方法、荧光定量PCR及Western Blot技术探究了Bphp致病生物学功能,研究结果表明:相较于野生型,在红光条件下,突变体?bphP生物膜的形成能力以及运动性显著增强,在不同的光照处理下生长能力均下降,在光照下致病力下降;而突变体?bphO的生物膜形成能力增强,运动能力和致病性降低,但两个基因的缺失均不影响非寄主的过敏性反应。bphP和bphO基因的缺失影响鞭毛相关基因fliC、胞外水解酶基因eng、菌毛相关基因pilQ、趋化性相关基因cheA、毒力蛋白基因trbC和Ⅲ型分泌系统(TypeⅢsecretion system,T3SS)关键基因hrpG和hrpX等的表达,而且bphP对这些致病相关基因的表达调控受到光的影响。在探究BphP蛋白与T3SS之间的关系时,通过荧光定量PCR和Western Blot实验发现基因bphP缺失后hrpG和hrpX在转录和蛋白水平均出现下调趋势,这一趋势在光照和黑暗条件下有所不同。综上所述,西瓜噬酸菌BphP调控致病性的生物学功能依赖于光,BphP感知红光信号进而调控运动性、生物膜、生长能力等致病因子的表达,并参与调控T3SS关键因子hrpG和hrpX的表达。
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