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硒(Selenium)是一种生物体所必需的微量营养元素,具有诸多的生物学作用,而且硒是谷胱甘肽过氧化酶不可缺少的活性组成部分,可以保护生物膜的通透性,从而抑制一些人类常见病的发生。然而目前人体内的硒含量都处于缺乏状态,大多数情况下,天然食品中的硒含量也普遍很低,如果仅仅依靠天然食物来补充硒,这一途径是远不能满足人体正常需求的。酵母因为其生长速度快,培养方便,富含高蛋白、丰富的B族维生素和一些对人体有益的矿物质,成为了最广泛最安全的营养微生物,渐渐的走进了人们的视线。对于一些微量营养元素,酵母还具有很强的富集作用,更能将有毒无机硒转化为被人体吸收的有机硒,与其他的一些无机硒相比,富硒酵母存在以下几点优势:1.利用率高;2.毒性低;3.营养价值高;4.硒含量高;5.生理活性高。因此利用酵母来富集硒是一个安全又高效的办法,所以富硒酵母渐渐成为了目前科研中的研究热点之一。本研究以实验室保存的命名为Y1的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为实验材料,经紫外线和亚硝酸复合诱变后,选育出了一株富硒能力强、菌体生物量高的突变菌株,同时确定出富硒酵母的最佳培养条件。1.将酵母细胞悬浮液经1mL0.1mol/L的NaNO2溶液和7mL pH4.4HAc-NaAc缓冲液处理14min后,在紫外线下照射8min,得到突变株Y12的生物量和硒含量最高,其菌体生物量由原来的8.83g/L提高到12.10g/L,硒含量由原来的611μg/g提高到832μg/g。2.对筛选出的高产Y12突变菌株进行五次传代培养后,没有发生回复突变,证明经复合诱变后的菌株遗传稳定。3.对不同类型的培养基进行筛选,同时对培养基成分中碳、氮源和无机盐的种类进行优化,最终确定了最佳的培养基成分:麦芽浸粉1%、蔗糖2%、蛋白胨1%、尿素1%、KH2PO40.05%、MgSO40.1%。此条件下得到的菌体生物量为17.65g/L,硒含量为93μg/g。4.在单因素实验中,我们得出了菌体生物量和硒含量最高时的组合:硒添加量20ug/mL、培养时间40h、发酵温度28℃、接种量12%、装液量60mL/250mL。5.我们挑选出对突变株生物量和硒含量有明显影响作用的硒添加量、接种量和装液量进行了三因素三水平的正交试验,进一步确定了最优发酵条件组合,此条件下的生物量为18.95g/L,硒含量为:993μg/g。