伊犁昭苏不同动物源大肠杆菌耐药性检测及相关耐药基因分析

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为了解新疆伊犁昭苏地区不同动物源大肠杆菌耐药性和耐药基因携带情况,并针对性地给出用药指导。从伊犁昭苏地区斯塔斯村、乌克勒加尔村、斯木塔斯村等12个采样点采集牛鼻及肛拭子(各200份);从斯木塔斯村、别迭村、森塔斯村家庭、森塔斯村养殖小区4个采样点采集羊鼻及肛拭子(各210份);从克马克加尔村、森塔斯村养殖小区、乌克勒加尔村3个采样点采集鸡泄殖腔拭子(300份);从喀夏加尔镇散户采集马鼻及肛拭子(各46份),共计1212份样品,进行大肠杆菌的分离鉴定。通过琼脂稀释法测定其六大类10种抗菌药物的MIC值,采用PCR技术检测对应耐药基因。结果如下:1.大肠杆菌分离结果:1212份样品共分离大肠杆菌1010株,分离率为83.3%。不同来源样品大肠杆菌分离率分别为:牛肛拭子(96.5%,193/200)、羊肛拭子(93.3%,196/210)、鸡泄殖腔拭子(96.3%,289/300)、马肛拭子(91.3%,42/46);牛鼻拭子(53.5%,107/200)、羊鼻拭子(77.1%,162/210)、马鼻拭子(45.7%,21/46)。2.耐药表型检测结果:伊犁昭苏地区大肠杆菌对氨苄西林耐药率最高,为10.1%(102/1010),其余被检抗菌药物耐药率均小于10.0%。(1)33株耐药牛源大肠杆菌多药耐药主要分布在1~3耐之间,以1耐为主,占70.0%(23/33)。乌克勒加尔村和叶勒太村牛源大肠杆菌各自只分离到1株1耐的耐药菌,耐药率为14.3%(1/7)和6.3%(1/16)。斯木塔斯村、森塔斯村牧场、森塔斯村养殖小区和森塔斯村家庭牛源大肠杆菌以1耐为主,分别占75.0%(9/12),75.0%(6/8),75.0%(6/8)和66.7%(2/3),其余采样点未分离到耐药菌株。(2)羊源大肠杆菌对亚胺培南、阿米卡星和硫酸粘菌素敏感。所有采样点对其余被检抗菌药物的耐药率均低于3.0%。(3)鸡源大肠杆菌对氨苄西林(31.5%,91/289)、氟苯尼考(26.0%,75/289)和四环素(20.1%,58/289)的耐药率最高,均大于20.0%。森塔斯村鸡源大肠杆菌对氨苄西林(40.0%,8/20)、头孢唑啉(35.0%,7/20)、氟苯尼考(45.0%,9/20)、恩诺沙星(40.0%,8/20)、硫酸粘菌素(30.0%,6/20)的耐药率在30.0%及以上。克马克加尔村鸡源大肠杆菌耐药谱型最丰富,多达32种。乌克勒加尔村鸡源大肠杆菌耐药率最低,全部低于20.0%。鸡源大肠杆菌耐药严重程度由高至低依次为森塔斯村、克马克加尔村、乌克勒加尔村。3.伊犁昭苏地区不同动物源大肠杆菌耐药基因检出率由高到低依次为鸡源、羊源、牛源、马源。牛源和羊源大肠杆菌耐药基因检出率极低,鸡源大肠杆菌耐药基因携带率较低。森塔斯村一株牛源耐药大肠杆菌检出bla CTX-M基因(0.3%,1/300);斯木塔斯村一株羊源耐药大肠杆菌同时检出bla TEM(0.3%,1/358)、flo R(0.3%,1/358)和tet A(0.3%,1/358)基因。鸡源大肠杆菌检出9种耐药基因,其中检出率超过17.0%的基因有flo R(25.6%,74/289)、tet A(18.0%,52/289)和bla TEM(18.0%,52/289)基因,也是克马克加尔村鸡源大肠杆菌检出率最高的基因。所有被检耐药基因中,森塔斯村鸡源大肠杆菌只检出tet A(20.0%,4/20)flo R(50.0%,10/20)、bla CTX-M(15.0%,3/20)和bla TEM(20.0%,4/20)这四个耐药基因,但携带率较高。乌克勒加尔村鸡源大肠杆菌除flo R基因的检出率达18.7%外,其余5种耐药基因的检出率在1.3%~6.7%之间。结论:伊犁昭苏地区不同动物源大肠杆菌耐药性存在差异,除马源大肠杆菌外,其余动物源大肠杆菌均存在同时耐三种或以上抗菌药物的多药耐药菌株,不同采样点大肠杆菌耐药性也不同,应针对性地选用抗菌药物,防止携带耐药基因的耐药菌进一步扩散传播。
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