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【目的】先通过胃癌组织中相关微小RNA表达谱的分析,发现微小RNA在胃癌组织中的表达规律;再结合临床相关因素分析,探寻它在胃癌辅助诊断中的价值;最后研究胃癌相关微小RNA的功能,揭示微小RNA在胃癌发生、发展中的可能机制。【方法】1.收集胃癌组织及癌旁组织,分别提取RNA进行微小RNA芯片分析,筛选出在胃癌和癌旁组织中差异表达的微小RNA。2.选取表达水平差异较大的微小RNA,分析其表达水平与胃癌组织分化程度、TNM分期、组织类型和转移等病理特征之间的关系,初步阐明其临床意义。3.设计并合成胃癌组织中高表达的微小RNA的抑制剂,用脂质体转染到SGC-7901和MGC-803胃癌细胞中,分别分析细胞增殖情况(MTT法)、微小RNA表达受抑制程度(实时定量RT-PCR)及主要靶基因表达(Western blot印迹)变化等,揭示这些微小RNA的可能致癌机制。【结果】1.运用微小RNA芯片技术筛选出19种在胃癌组织异常表达的微小RNA(其中12种高表达、7种低表达)。2.免疫组织化学结果显示,微小RNA的异常表达(如miR-106,miR-21及miR-17-92基因簇的高表达)与肿瘤相关蛋白(如Rb, PTEN及E2F1)的变化密切相关。3. miR-421在胃癌组织中显著高表达,抑制其在胃癌细胞中的表达可阻止胃癌细胞的生长。miR-421表达程度与肿瘤相关蛋白CBX7和RBMXL1的表达程度呈负相关,说明微小RNA抑制剂的有效性。4.针对3种在胃癌组织中高表达的微小RNA(miR-17、miR-106a和miR-421)的特异性抑制剂能有效抑制SGC-7901和MGC-803细胞中相应微小RNA的表达,并以剂量依赖方式抑制胃癌细胞的增殖;抑制剂对SGC-7901胃癌细胞增殖的抑制效果大于对MGC-803的抑制效果。【结论】微小RNA与胃癌发生发展的关系非常密切,其机制与调控其相关靶基因的表达有关。miR-421可能在胃癌发生的早期阶段发挥用,有希望作为一个早期诊断的胃癌标志物。胃癌组织中高表达的微小RNA的特异性抑制剂能有效抑制胃癌细胞的增殖,有可能用于胃癌的治疗。