芽孢杆菌B10对巨噬细胞及小鼠抗氧化功能影响的研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flyingmain
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
氧化反应是动物机体内物质新陈代谢不可缺少的生理活动,其实质是物质间的电子传递。然而部分电子在传递过程中不可避免的会发生逸散,这些逃逸的不配对电子就是所谓的自由基。当环境中的自由基过量累积,超过了抗氧化系统的还原力,就会产生氧化损伤,使动物体处于氧化应激状态。芽孢杆菌是一种优质、安全的肠道益生菌,具有安全、无耐药性等特点。其某些菌株是一种理想的微生物抗氧化剂。本研究以本实验筛选获得的一株抗氧化活性较好的芽孢杆菌B10为材料,分别研究了其对巨噬细胞(RAW264.7)和小鼠在氧化应激状态下的抗氧化功能的影响,其主要研究结果如下:   1.在鼠巨噬细胞(RAW264)培养液中分别添加0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、400μmol/L、500μmol/L的H2O2,研究其对培养3h、6h、9h后巨噬细胞抗氧化功能的影响。结果表明,与对照组相比,当细胞培养液中H2O2低于200μmol/L时,不会引起巨噬细胞产生明显的应激损伤;300μmol/L时细胞LDH、MDA活性明显降低(P<0.05),但是T-AOC并未发生明显变化;400μmol/L时,巨噬细胞T-AOC有所降低但是并不显著;当增加至500μmol/L时,T-AOC有所降低,MDA含量和LDH活性均明显降低,说明此时细胞已产生氧化损伤。比较各时段巨噬细胞抗氧化活性发现,培养6小时后可以产生适当的氧化应激。由于H2O2的作用时间和作用浓度存在互作效应。因此确定500μmol/L的H2O2处理6h可使巨噬细胞产生适当的应激条件。   2.以维生素E(VE)为抗氧化剂阳性对照,研究了枯草芽孢杆菌B10对氧化应激状态下巨噬细胞(RAW264)抗氧化的影响。结果发现:与氧化应激组相比,培养液中添加VE可以提高巨噬细胞培养液的T-AOC,但是不能提高相关抗氧化酶类的活性,也不能缓解由脂质过氧化反应引起的丙二醛(MDA)含量升高。VE主要是依靠本身的还原性中和环境中的氧化物质,从而实现其抗氧化功能。与氧化应激组相比,培养液中添加枯草芽孢杆菌B10能够显著提高巨噬细胞的T-AOC(P<0.05),降低了MDA的含量(P<0.05)。B10主要通过诱导巨噬细胞提高GSH-Px(P<0.05)、SOD(P<0.05)和CAT(P<0.05)等抗氧化酶的活性,提高巨噬细胞对超氧阴离子等自由基的清除能力,降低MPO等活性从而减少内源性自由基的产生(P<0.05)。与VE组相比,B10可以通过诱导细胞提高对抗氧化酶以及抗氧物质的合成,提高细胞的抗氧化活性,其抗氧化效果更好。   3.研究了枯草芽孢杆菌B10对氧化应激状态下巨噬细胞免疫功能的影响。分别用适当浓度的枯草芽孢杆菌B10和VE孵育巨噬细胞12小时,然后弃去培养液中的B10和VE,再添加500μmol/L的H2O2刺激6h。结果发现,与空白组相比,H2O2可以影响巨噬细胞部分细胞因子的分泌水平,可以显著提高IFN-α、IL-12、IL-8等的的含量。与氧化应激组相比,维生素E可以使IFN-α的含量降低;枯草芽孢杆菌B10则能够使IFN-γ的含量降低。与VE组相比,培养液中添加枯草芽孢杆菌B10能够使IFN-α、IP-16的含量显著增加(P<0.05),IFN-γ、IL-1β的含量显著降低。H2O2是强氧化剂,刺激细胞产生明显的炎症,枯草芽孢杆菌可以通过提高细胞的抗氧化活性,降低氧化损伤,从而减轻炎症反应,B10的抗炎效果与其抗氧化效果一致。   4.研究了枯草芽孢杆菌B10对应激状态巨噬细胞以及高脂日粮小鼠氧化应激相关基因表达的影响。将60只体重相近(35g±1g)的普通ICR小鼠随机分为对照组(基础日粮)、高脂组(高脂日粮)、TBHQ组(添加0.01%(W/W)TBHQ的高脂日粮)处理组(添加0.1%芽孢杆菌B10的高脂日粮)。每组3个重复,每个重复5只。巨噬细胞分组及处理同3。结果表明,与对照组相比,B10能够明显缓解高脂引起的小鼠肥胖(P<0.05),降低肝脏中8-羟基脱氧鸟苷水平(P<0.05),以及降低GR、XO和AP-1的表达水平(P<0.05),p38和p53基因表达水平显著提高(P<0.05)。在巨噬细胞中,与对照组相比,B10可以显著降低SOD(P<0.05)和p53表达水平(P<0.05),可以显著升高GST(P<0.05)和AP-1(P<0.05)。芽孢杆菌B10可以诱导小鼠和巨噬细胞增强机体的抗氧化能力,但是B10对小鼠肝脏和巨噬细胞诱导途径不同。
其他文献
我们每一位同学的“小博士笔记”都是一本丰富多作品集,它记下了我们生活和学习中点点滴滴的回忆。一、回顾师:这段时间,我们的好朋友——小博士笔记,又伴随我们度过了一个多
在英语教学中,“学困生”一直都是每位教师感到非常棘手的问题.然而实践证明,成功的教育转化他们,不仅能大面积提高整体英语教学质量,全面提高英语学困生的素质,使他们形成良
地理课是学生在校学习必不可少的学科,融自然科学与社会科学于一体,古人用:“上知天文,下知地理”,来形容一个人的知识非常丰富,学问非常渊博.
通过108份水稻土耕作层上样、25个剖面土样调查,太仓县土壤的有效锌含量为0.31 ~14.17mg/kg,平均1.61mg/kg.有效锌含量与土壤碳酸钙含量、pH值均呈负相关;与质地粘粒(
背景:rn这节课是我校和其他两所中学联合申报省科研课题中的一节课,属于欣赏、评述范畴,由我在十×中学初三年级随机选择班级授课.
面对变化纷繁的时代潮流,中西服饰文化不断进行碰撞和融合,如何准确地把握时代的脉搏,从历史中寻找到服饰发展的内在规律,是当代服饰发展所面对的一个重要问题。本文就15-16
在建构主义提出的学生观中,我特别注意到这样的一些思想:“学习者并不是空着脑袋进入学习情境中的”,“他们对任何事情都有自己的看法”,“教学不是知识的传递,而是知识的处理和转换”。我想作为教师应当把学习者原有的知识经验作为新知识的生长点,引导学习者从原有的知识经验中,生长新的知识经验,而问题式教学是一种有效的途径,问题式教学的特点是以问题的设计和解决为主要形式,层层推进,环环相扣,将教学的重点和难点由
写作教学活动的开展,不仅能锻炼学生的逻辑思维能力,同时还能够提高学生的文字表达能力.在初中阶段的写作教学中,教师应及时储备好写作所需的素材,同时引导学生掌握高效的写
在高中必修3教材算法初步的章末,为拓展学生的视野,进一步感受算法的意义和价值,帮助学生理解案例的数学本质,安排了“算法案例”一节内容,介绍了两个中国古代算法案例.案例
最近,四川工人日报社在成都举行创刊40周年纪念会。中共四川省委常委、省委宣传部部长许川到会代表省委向四川工人日报社全体同志表示热烈祝贺并发表讲话。他说,川工报在40