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目的:侵袭性曲霉菌感染(invasive aspergillosis,IA)是一种严重威胁免疫力低下病人生命的感染,早期准确的诊断和治疗是良好预后的关键。本研究首先建立核酸序列依赖扩增(nucleic acid sequence-basedamplification,NASBA)检测曲霉菌的方法,再结合荧光定量PCR(qPCR)及GM试验应用于IA的临床诊断,确立IA的最佳实验室诊断策略。方法:首先在实验室内利用烟曲霉菌标准株(CMCC A1a)建立NASBA结合电泳检测曲霉菌的方法,并对其灵敏度、特异性进行了评估。然后对NASBA结合分子信标(MB)用于定量检测曲霉菌的可行性进行了探索。最后分别利用NASBA、荧光定量PCR及GM试验三种方法对80例IA高危病患的血液标本进行检测,计算三种诊断方法的各项性能指标,并对各种诊断方案进行比较,最终确定IA实验室诊断的最佳方案。结果:在实验室内成功建立NASBA检测曲霉菌的方法,其特异性良好,灵敏度达到了1Cfu;曲霉菌孢子量的对数与MB荧光信号达到设定阈值时的时间存在线性相关关系(y=-10.7x+81.6,r=0.9889)。NASBA、qPCR及GM试验三种方法的灵敏度分别为76.47%、67.65%、52.94%,特异度分别为80.43%、89.13%、80.43%。联合诊断结果显示,NASBA与qPCR串联方案有最好的特异度(100%)及阳性预测值(100%);NASBA与qPCR并联方案则最为灵敏(94.12%)。结论:NASBA结合MB可用于定量检测曲霉菌。NASBA用于诊断IA最为敏感,而qPCR则最为特异,GM试验的表现差于前两者。联合应用的诊断策略能够提高诊断效能,提高临床早期诊断IA的准确性。