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奶牛乳腺炎是导致奶牛行业严重损失的一种常见疾病之一。一般分为临床型乳腺炎和隐性乳腺炎两种。而隐性乳腺炎则因为其无明显症状而难以发现，以至于在奶牛群中广泛存在，而且存在巨大的危害。本研究旨在分离鉴定湖北地区致奶牛乳腺炎的病原菌，鉴定细菌的耐药特征与致病性特征，为奶牛乳腺炎防治提供理论依据。从湖北两个主要奶牛小区的9个不同规模的奶牛场采集牛奶样本200份，其中3份为临床乳腺炎样本，另有47份经确定为隐性乳腺炎。两地区隐性乳腺炎的检出率分别为38.5％（20／52）与20％（29／145）。并从乳腺炎牛奶中共分离到7种细菌，其中金黄色葡萄球菌11株，表皮葡萄球菌10株，无乳链球菌10株，停乳链球菌14株，乳房链球菌2株，大肠埃希氏菌4株，克雷伯氏菌4株。并对所分离的金黄色葡萄球菌进行了溶血试验和凝固酶试验等毒力的初步检测试验，有3株呈阳性。而且两地区乳腺炎牛奶的细菌种类分布也各不同。武汉东西湖地区共分离出24株细菌，其中停乳链球菌的分离率最高，占33.3％（8／24），其它细菌的比例分别为：表皮葡萄球菌5株（占20.8％），大肠埃希氏菌4株（占16.7％），金黄色葡萄球菌2株（占8.3％），无乳链球菌2株（占8.3％），肺炎克雷伯氏菌2株（占8.3％），乳房链球菌1株（占4.2％）。宜昌宜陵区共分离出细菌31株，以金黄色葡萄球菌分离率最高，占29％（9／31）。其它细菌的比例为：其次为无乳链球菌占25.8％（8／31），停乳链球菌6株（占19.4％），表皮葡萄球菌5株（占16.1％），乳房链球菌1株（占3.2％），肺炎克雷伯氏菌2株（占6.5％），未分离到大肠杆菌。分别对所有分离株进行12种药物的敏感性试验，结果表明所有菌株对先锋V、氧氟沙星均高度敏感，对临床常用的青霉素、链霉素具有较高的耐药性。本试验对所分离的病原菌进行了生物被膜形成的初步试验，进行了定性和定量的分析。用试管进行的定性分析中，可以染色看出有36株细菌可以形成生物被膜，而通过96孔板进行的OD630的定量分析中，根据结果只有26株菌可以形成生物被膜，存在一定的差异。该结果提示：生物被膜的形成可能是致乳腺炎病原菌的致病机制之一。