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目的:探讨长春西汀对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制方法:选用鼠龄3~4个月、体重为270±30 g的健康雄性Wistar大鼠,制作大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,采用缺血2h再灌注12h的时间点。第一部分实验分为5组:Sham组(假手术组),IR组(模型组),Vinp组(长春西汀组)设置不同干预剂量亚组,即Vinp5组、Vinp10组、Vinp20组。采用Longa五分制评分法,对各组动物进行神经功能学评分;TTC染色计算脑梗死面积百分比。第二部分实验分为3组:Sham组、IR组、Vinp10组。采用Western blot检测AQP-4、MMP-9蛋白的表达,分析长春西汀对血脑屏障通透性的影响;检测SOD活性、MDA含量,评价长春西汀抗自由基损伤的作用;采用Western blot检测IL-1β、IL-10、TNF-α蛋白的表达,探讨长春西汀的抗炎作用;采用Western blot检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达,探讨长春西汀抗细胞凋亡的机制;采用Western blot检测Cx43及p-Cx43蛋白表达水平,明确长春西汀是否通过调控缝隙连接发挥神经保护作用。结果:(1)大鼠脑缺血再灌注后出现明显的神经功能缺损症状,多表现为向右侧倾倒、转圈,或右侧上肢不能完全伸展;Vinp10组、Vinp20组与IR组相比神经功能学评分均明显改善(P<0.05),而Vinp10与Vinp20组间无明显差异(P>0.05)。(2)与IR组相比,Vinp5组大鼠脑梗死面积未见明显缩小(P>0.05),Vinp10及Vinp20组脑梗死面积可见明显减少(P<0.01);Vinp20组与Vinp10组相比无明显差异(P>0.05)。因此,后续试验中选用10mg/Kg为Vinp给药浓度。(3)脑缺血再灌注后大鼠皮层梗死区AQP-4与MMP-9蛋白表达明显增高(P<0.01);Vinp10组与IR组相比可显著降低上述蛋白表达量(P<0.01)。(4)脑缺血再灌注后SOD活性明显降低、MDA含量显著升高(P<0.01);Vinp10组与IR组相比可显著提升SOD活性、降低MDA含量(P<0.01)。(5)脑缺血再灌注后IL-1β、TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.01)、IL-10蛋白表达未见明显变化(P>0.05);Vinp10组与IR组相比明显降低IL-1β、TNF-α蛋白表达并升高IL-10蛋白表达(P<0.01)。(6)脑缺血再灌注后Bax及Caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值则明显下降(P<0.01);与IR组相比,Vinp10可明显降低Bax及Caspase-3蛋白表达(P<0.01),并显著升高Bcl-2蛋白的表达及Bcl-2/Bax比值(P<0.01)。(7)脑缺血再灌注后Cx43及p-Cx43蛋白表达明显减低(P<0.01);与IR组相比,Vinp10组可上调上述蛋白表达量(P<0.05)。结论:长春西汀可以显著改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损、减少脑梗死面积。这种保护作用是通过减轻血脑屏障通透性、清除自由基、抗炎、抗凋亡等机制实现的,而长春西汀对Cx43的调控可能是上述保护机制的基础。