JNK信号通路在胃泌素促进大肠癌细胞增殖中的作用及机制

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目的:探讨胃泌素对人大肠癌CACO2细胞的作用,以及在此过程中JNK信号通路与CACO2细胞增殖之间的关系。方法:利用体外细胞培养技术,控制CACO2细胞浓度达到1×107个/m L,用该细胞株建立裸鼠大肠癌移植瘤模型,建模成功后将18个裸鼠移植瘤模型分为A、B、C三组,A组不做任何处理,为空白对照组,B组定期原位瘤体皮下注射五肽胃泌素4μg,为胃泌素对照组,C组每隔24h原位瘤体皮下注射五肽胃泌素4μg和JNK抑制剂10μg,为JNK抑制剂对照组。A组和B组以胃泌素为对照,B组和C组以JNK抑制剂为对照,给予不同的处理,两周后剥除各组瘤体,给予称重、测量体积。利用PCR技术检测各组瘤体组织中JNK基因的m RNA表达情况,利用免疫印迹技术(Western blot)检测各组瘤体组织中JNK1/2蛋白表达水平。结果:移植瘤重量:胃泌素对照组(7.79?0.34)和空白对照组(4.59?0.64)比较,胃泌素对照组瘤体重量明显重于空白对照组(P<0.05),有统计学意义。胃泌素对照组(7.79?0.34)和JNK抑制剂对照组(4.91?0.37)相比,胃泌素对照组重量大于JNK抑制剂对照组,(P<0.05),有统计学意义。移植瘤体积测量:胃泌素对照组(3.16?0.14)和空白组(1.86?0.26)比较,(P<0.05),有统计学意义。胃泌素对照组(3.16?0.14)与JNK抑制剂对照组(1.99?0.15)对比,胃泌素对照组大于JNK抑制剂对照组,(P<0.05),有统计学意义。m RNA表达水平:胃泌素对照组(2.375±0.342)表达水平高于空白对照组(0.913±0.097),(P<0.05),有统计学意义。胃泌素对照组(2.375±0.342)表达水平高于JNK抑制剂对照组(1.527±0.326),(P<0.05),有统计学意义。JNK1/2蛋白表达水平:胃泌素对照组(3.192±0.282)表达水平高于空白对照组(0.231±0.011),(P<0.05),有统计学意义。胃泌素对照组(3.192±0.282)表达水平高于JNK抑制剂对照组(0.612±0.124),(P<0.01),有统计学意义。结论:胃泌素可以促进可表达CCKBR的人大肠癌CACO2细胞增殖,其可能的途径是通过胃泌素作用于人大肠癌CACO2细胞膜上的CCKBR,增加CACO2细胞内JNK信号通路的活性,从而促进人大肠癌CACO2细胞的增殖。
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