【摘 要】
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目前,乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)仍以其庞大的人口基数威胁着人类的健康和生命。新生儿感染HBV,大部分发展为慢性肝炎,而成年人感染HBV则多发生急性自限性肝炎。H
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目前,乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)仍以其庞大的人口基数威胁着人类的健康和生命。新生儿感染HBV,大部分发展为慢性肝炎,而成年人感染HBV则多发生急性自限性肝炎。HBV导致的慢性肝炎进而发生肝纤维化、肝硬化,最终以肝癌结局,而急性自限性肝炎多以自愈结局。很多科研工作者研究了慢性肝炎和急性自限性肝炎的感染和发病过程,试图寻找HBV在两个年龄段引发不同病症的原因,但未取得太多成果。新生和成年土拨鼠感染土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus, WHV)后,发病状况与对应年龄人类感染HBV后相似。本课题拟用土拨鼠寻找肝组织中可能导致这种预后差异的关键基因。采用全基因组表达谱芯片技术,对比新生与成年小鼠肝组织差异表达基因,选取目的基因,再通过多个物种序列比对,设计简并引物,在土拨鼠肝组织cDNA中扩增对应基因片段,测序,再次设计引物,进行实时荧光定量PCR。与新生士拨鼠相比,成年土拨鼠肝细胞中与钙离子重吸收相关基因Dnml (Dynamin1)、Dnm3(Dynamin3)及Prkcc (Protein kinase C, gamma)表达率明显升高,分别上升2.65+0.25倍,1.90±0.34倍,2.94-0.54倍。钙离子重吸收通路中,Dnm1、Dnm3、Prkcc在两组动物肝脏中表达差异最明显,并且在新生组与成年组土拨鼠之间也有明显差异。此类基因造成肝细胞内钙离子浓度的差别,间接影响其中肝炎病毒的复制。这种表达差异很可能是导致两个年龄段动物感染土拨鼠肝炎病毒后转归不同的原因之一。
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