非洲菊三个花瓣伸展候选基因转化拟南芥的研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanghao521146
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本实验室前期结果表明,外施赤霉素(GA)和脱落酸(ABA)分别促进和抑制非洲菊舌状花瓣的伸长,并通过转录组测序和表达谱分析筛选得到了GA与ABA处理后差异表达的候选转录因子。本文主要开展其中3个非洲菊花瓣伸展候选基因GhZFP、GhBRG1和GhMYB62异源转化拟南芥的研究。分别构建了以上3个基因的超表达载体、EGFP超表达载体及pER8诱导表达型载体,并成功获得相应的转基因纯合植株,以此开展表型分析及下游可能相关基因的表达分析,主要取得了以下研究结果:  1、分别获得了35S∷EGFP∷ GhZFP、35S∷ GhZFP以及雌激素诱导表达的pER8∷GhZFP转基因拟南芥植株。研究结果表明GhZFP蛋白定位于细胞核内,GhZFP超表达抑制拟南芥幼苗根、下胚轴、子叶的生长和花器官的生长。  2、通过对子叶表皮细胞和花瓣表皮细胞的观察,发现GhZFP超表达抑制子叶和花瓣伸展是通过抑制细胞伸展实现的。  3、分别检测了35S∷GhZFP、诱导表达的pER8∷GhZFP转基因植株幼苗及35S∷GhZFP转基因植株花器官中EXPANSIN、GASA、TUBULIN、GA及ABA途径相关基因这5大类基因的表达,结果表明GhZFP超表达影响了其中大部分基因的表达。  4、分别用1μM GA3和10μM Flu(ABA合成抑制剂)处理35S∷GhZFP、诱导表达的pER8∷GhZFP转基因植株幼苗,发现在根长、下胚轴长、子叶细胞大小方面,激素处理下超表达植株的增长幅度大于野生型,说明GhZFP超表达可能部分影响了GA的合成和ABA的合成。  5、获得了35S∷GhBRG1∷EG FP、35S∷ GhBRG1转基因拟南芥植株。研究结果表明GhB RG1蛋白定位于细胞核内,GhBRG1超表达使拟南芥植株出现晚花表型。  6、获得了35S∷GhMYB6∷EG FP、35S∷GhMYB62转基因拟南芥植株。研究结果表明GhMYB62蛋白定位于细胞核内,GhMYB62超表达对拟南芥营养生长阶段没有明显的影响。  研究结果表明,在3个花瓣伸展候选基因中,GhZFP是参与子叶及花瓣伸展的调控因子。GhZFP通过抑制细胞的伸展从而对植物的幼苗发育以及花器官发育发挥作用。此外,GhZFP可能部分通过影响GA与ABA的合成来调节植物的生长发育。  
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